| 日本鳗鲡肝脏表达抗菌肽2基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 段明珠,黄贝,梁英,张芳芳,聂品,黄文树. 日本鳗鲡肝脏表达抗菌肽2基因的克隆与表达[J]. 水生生物学报, 2016, 40(2): 252-260. DOI: 10.7541/2016.35 |
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| 作者姓名： | 段明珠 黄贝 梁英 张芳芳 聂品 黄文树 |
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| 作者单位： | 1. 集美大学水产学院,厦门361021;鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心,厦门361021;2. 中国科学院水生生物研究所,武汉,430072;3. 集美大学水产学院,厦门361021;鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心,厦门361021;福建省海洋生物资源开发利用协同创新中心,厦门361021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31172438和U1205123)，福建省自然科学基金(2012J06008;201311180002和2014J05042)，教育部留学回国人员科研启动金资助[Supported by the National Natural Science Foundation of China(.31172438 and U1205123)，the Natural Science Foundation of Fujian Province(.2012J06008 |
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| 摘 要： | 为探讨鱼类抗菌肽基因的生物学功能,研究应用RACE方法克隆获得了日本鳗鲡 (Anguilla japonica) 肝脏表达抗菌肽2基因 (Liver-Expressed Antimicrobial Peptide 2,LEAP-2),即AJLEAP-2的cDNA序列,全长为450 bp,开放阅读框编码89个氨基酸。其成熟肽含有LEAP-2保守基序C-X5-C-X4-C-X4-C。AJLEAP-2基因组结构与其他脊椎动物LEAP-2相同,都包含有三个外显子。利用荧光定量PCR检测了AJLEAP-2在日本鳗鲡不同组织/器官中的表达,发现其转录子在肝脏中表达量最高,是内参基因 (-actin) 的6倍; 其次是肠道,但其表达量仅为肝脏的1/130。此外,还检测了AJLEAP-2在日本鳗鲡玻璃鳗(Glass eel)阶段的转录表达水平,结果显示,玻璃鳗中AJLEAP-2的转录表达量仅低于黑仔期的肝脏,为黑仔鳗肠道表达量的2倍。LPS和迟缓爱德华菌 (Edwardsiella tarda) 刺激能显著上调鳗鲡血液中AJLEAP-2的转录表达,刺激16h后上调倍数最高,分别为对照组的86倍和12倍。此外,LPS刺激72h和E. tarda 刺激8h后,肠道中AJLEAP-2显著上调表达(P0.05),为对照组的8倍。Poly I:C刺激24h后,血液中AJLEAP-2转录表达显著下调。结果表明,AJLEAP-2在日本鳗鲡抗细菌感染过程中起重要的作用。
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| 关 键 词： | 抗菌肽 LEAP-2 日本鳗鲡 迟缓爱德华氏菌 |
| 收稿时间： | 2015-06-07 |
MOLECULAR CLONING AND EXPRESSION ANALYSIS OF A LIVER EXPRESSED ANTIMICROBIAL PEPTIDE-2 IN JAPANESE EEL,ANGUILLA JAPONICA |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Anguilla japonica LEAP-2 Antimicrobial peptide Edwardsiella tarda |
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