| OVA—接头—β2m融合基因的构建及体内特异性CTL的诱导 |
| |
| 引用本文： | 钱丽,钱关祥.OVA—接头—β2m融合基因的构建及体内特异性CTL的诱导[J].生物化学与生物物理学报,2002,34(5):547-552. |
| |
| 作者姓名： | 钱丽 钱关祥 |
| |
| 作者单位： | 上海第二医科大学分子生物学实验中心 上海200025
(钱丽)，上海第二医科大学分子生物学实验中心 上海200025(钱关祥) |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (No .30 1 71 0 48) |
| |
| 摘 要： | 构建融合基因OVA 接头 β2m的表达载体 ,通过接头 (linker)序列使 β2微球蛋白 (β2m)与肽段共价结合 ,限制其在体内的扩散 ,以期获得更具潜力的免疫原结构。采用PCR技术 ,从人肝癌细胞株SMMC 772 1中克隆人 β2m基因 ,拼接上卵白蛋白 (OVA) (2 5 7— 2 6 4 )序列及接头后 ,克隆入 pET 4 2b( )高效表达载体进行诱导表达。对表达产物进行纯化与复性后 ,用其作为免疫原诱导特异性CTL ,并构建H 2Kb 四聚体检测特异性CTL。应用H 2Kb 四聚体对特异性CTL检测结果与经典的细胞毒试验一致 ,同时对胞外IFN γ进行了定量检测。结果表明 ,OVA 接头 β2m的表达产物可有效诱导体内特异性CTL反应 ,在体外构建MHC I类分子四聚体 ,为特异性T细胞的检测提供了有利的工具
|
| 关 键 词： | 四聚体 基因表达 纯化 复性 CTL |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
|
