| 皖南尖吻蝮蛇毒I型金属蛋白酶Acutolysin A的表达、重折叠及其生物学活性 |
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| 引用本文： | 向开军,余红秀,邹春森,袁培华,刘兢. 皖南尖吻蝮蛇毒I型金属蛋白酶Acutolysin A的表达、重折叠及其生物学活性[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2002, 0(5) |
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| 作者姓名： | 向开军 余红秀 邹春森 袁培华 刘兢 |
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| 作者单位： | 中国科学技术大学生命科学学院 合肥230027(向开军，余红秀，邹春森，袁培华)，中国科学技术大学生命科学学院 合肥230027(刘兢) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (No .3 9970 1 75 ) |
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| 摘 要： | 将皖南尖吻蝮蛇毒I型金属蛋白酶acutolysinA基因克隆进原核表达载体pBAD/gIIIA后得到重组表达质粒 pDS。在 0 .0 2 %的L ( ) 阿拉伯糖的诱导下 ,质粒pDS在E .coliTOP1 0中表达了重组acutolysinA。与其天然形式相比 ,重组蛋白质在N端和C端各增加了 2 2个和 8个氨基酸残基 (均源于载体序列 ) ,并以包含体的形式存在于胞质中 ,表达量约占菌体总蛋白质的 5 %～ 1 0 %。在经 8mol/L尿素或 6mol/L盐酸胍变性及体外复性后 ,重组蛋白质获得了良好的免疫学及生物学活性。Western印迹及ELISA实验表明 ,天然金属蛋白酶acutolysinA与重组蛋白质具有良好的免疫反应相关性。动物实验表明 ,复性的重组蛋白质能明显引起皮下出血 ,其最低出血剂量约为 2 0 μg左右。1mmol/LEDTA、1mmol/LEGTA及 3mmol/L咪唑均能不同程度的抑制天然及重组金属蛋白酶的出血活性。PMSF没有明显的抑制效果。并对出血毒金属蛋白酶的出血机制进行了探讨
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| 关 键 词： | 蛇毒金属蛋白酶 表达 重折叠 出血活性 |
Expression, Refolding and Biological Activity of Recombinant Type I Metalloproteinase Acutolysin A from Agkistrodon acutus |
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| XIANG Kai Jun,YU Hong Xiu,ZOU Chun Sen,YUAN Pei Hua,LIU Jing. Expression, Refolding and Biological Activity of Recombinant Type I Metalloproteinase Acutolysin A from Agkistrodon acutus[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2002, 0(5) |
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| Authors: | XIANG Kai Jun YU Hong Xiu ZOU Chun Sen YUAN Pei Hua LIU Jing |
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| Affiliation: | XIANG Kai Jun,YU Hong Xiu,ZOU Chun Sen,YUAN Pei Hua,LIU Jing * |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | snake venom metalloproteinase expression refolding hemorrhagic activity |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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