| 人白细胞介素18半胱氨酸的定点突变及其对活性的影响 |
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| 引用本文： | 裴冬生,傅奕,等.人白细胞介素18半胱氨酸的定点突变及其对活性的影响[J].生物化学与生物物理学报,2002,34(1):57-61. |
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| 作者姓名： | 裴冬生 傅奕 |
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| 作者单位： | 徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心 徐州221002
(裴冬生，傅奕，孙亚锋)，徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心 徐州221002(赵惠仁) |
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| 摘 要： | 为研究IL 18结构与功能的关系 ,用重叠延伸PCR定点突变技术构建人白细胞介素 18(hIL 18) 4个半胱氨酸的突变体hIL 18C74 S、C10 4 S、C112 S和C163 S。将突变体的cDNA与原核细胞表达载体pJW2重组并转化大肠杆菌JM10 1。经热诱导后 ,4个突变体在大肠杆菌中均得到了高效表达。表达的蛋白质主要以包涵体的形式存在。包涵体经超声破碎 ,2mol/L尿素洗涤 ,8mol/L尿素溶解 ,SephadexG 10 0柱纯化后 ,纯度可达 90 %以上。以诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)产生IFN γ的能力为指标检测复性突变体的活性。结果显示除C10 4 S外 ,其他 3个突变体的生物活性均低于野生型hIL 18,C74 S、C112 S和C163 S的活性分别是野生型hIL 18活性的 5 %、5 8%和11%。证明Cys74 、Cys163 为hIL 18诱导产生IFN γ的功能所必需
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| 关 键 词： | 白细胞介素18 半胱氨酸 定点突变 突变体 |
Site-directed Mutagenesis of the Cysteines of Human IL-18 and Its Effect on IL-18 Activity |
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| PEI Dong-Sheng,FU Yi,SUN Ya-Feng,ZHAO Hui-Ren.Site-directed Mutagenesis of the Cysteines of Human IL-18 and Its Effect on IL-18 Activity[J].Acta Biochimica et Biophysica Sinica,2002,34(1):57-61. |
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| Authors: | PEI Dong-Sheng FU Yi SUN Ya-Feng ZHAO Hui-Ren |
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| Institution: | PEI Dong-Sheng,FU Yi,SUN Ya-Feng,ZHAO Hui-Ren * |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | interleukin 18 cysteine site-directed mutagenesis mutant |
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