重组猪α干扰素基因定点突变及在大肠杆菌中的表达 |
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作者姓名: | 陈涛 于瑞嵩 刘惠莉 李震 曹祥荣 |
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作者单位: | 1.南京师范大学生命科学学院,南京 210097;2.上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海 201106;3.上海市农业遗传育种重点实验室,上海 201106 |
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基金项目: | 上海市农科院重点学科青年科技骨干培养基金~~ |
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摘 要: | 用巨引物PCR法介导的定点突变把猪α干扰素(PoIFNα)第86位Cys(TGC)突变为Tyr(TAC),同时将其成熟蛋白N端第一个密码子TGT同义突变大肠杆菌偏爱的密码子TGC,构建了大肠杆菌融合基因表达载体pGEXIFN,表达产物占菌体总蛋白的20%。将以包涵体形式表达的目的蛋白经变、复性处理,并以FPLC进一步纯化,得到了具有较高生物活性的产物(5200IU/mg)。
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关 键 词: | 猪α干扰素, 巨引物PCR, 定点突变, 包涵体 |
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