| 双链RNA病毒诱导的牙鲆胚胎细胞差减cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 陈玉栋,张义兵,朱蓉,蒋珺,张奇亚,桂建芳.双链RNA病毒诱导的牙鲆胚胎细胞差减cDNA文库的构建[J].中国病毒学,2005,20(2):168-172. |
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| 作者姓名： | 陈玉栋 张义兵 朱蓉 蒋珺 张奇亚 桂建芳 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院水生生物研究所,淡水生态与生物技术国家重点实验室,湖北武汉,430072;中国科学院研究生院,北京,100039
2. 中国科学院水生生物研究所,淡水生态与生物技术国家重点实验室,湖北武汉,430072 |
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| 基金项目： | 863计划项目(2002AA626010,2004AA621030);国家自然科学基金资助项目(30200207, 30471333);中国科学院知识创新方向项目(KSCX2-SW-303) |
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| 摘 要： | 以紫外线灭活的dsRNA病毒草鱼出血病病毒(GCHV)诱导和模拟诱导的牙鲆胚胎细胞为材料,利用抑制性差减杂交(SSH)技术,成功构建了双链RNA病毒诱导的牙鲆胚胎细胞(FEC)差减cDNA文库.以管家基因α-tublin作为差减指标,经检测,该文库差减效率达2 10倍,表明经病毒诱导后某些差异表达基因也得到了相应倍数的富集.将获得的cDNA片段连接到pGEM-T载体,PCR检测显示差减片段在250bp～2 000bp之间.该差减cDNA文库的构建为从分子水平研究牙鲆培养细胞对dsRNA病毒的免疫反应、以及进一步鉴定和克隆差异表达基因打下了坚实基础.
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| 关 键 词： | 牙鲆 草鱼出血病病毒 双链RNA病毒 抑制性差减杂交 cDNA文库 |
| 文章编号： | 1003-5125(2005)02-0168-05 |
| 修稿时间： | 2004年9月7日 |
Construction of a Subtractive cDNA Library from the Paralichthys olivaceus Embryonic Cells Induced by a Double-Stranded RNA Virus |
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| CHEN Yu-dong,ZHANG Yi-bing,ZHU Rong,JIANG Jun,ZHANG Qi-ya,GUI Jian-fang.Construction of a Subtractive cDNA Library from the Paralichthys olivaceus Embryonic Cells Induced by a Double-Stranded RNA Virus[J].Virologica Sinica,2005,20(2):168-172. |
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| Authors: | CHEN Yu-dong ZHANG Yi-bing ZHU Rong JIANG Jun ZHANG Qi-ya GUI Jian-fang |
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