| 红莲型水稻杂种F1花药噬菌体展示文库的构建 |
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| 引用本文： | 胡朝凤,彭晓珏,周杨永,谭艳平,李绍清,朱英国.红莲型水稻杂种F1花药噬菌体展示文库的构建[J].遗传,2008,30(6):771-775. |
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| 作者姓名： | 胡朝凤 彭晓珏 周杨永 谭艳平 李绍清 朱英国 |
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| 作者单位： | 武汉大学生命科学学院,武汉大学植物发育生物学教育部重点实验室,武汉430072 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 噬菌体展示是研究蛋白质相互作用的重要手段, 为深入研究红莲型水稻不育和育性恢复的分子机理, 以红莲型水稻杂种F1花药为材料, 分离纯化mRNA, 经反转录合成双链cDNA, 在双链cDNA 末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头, 再用EcoRⅠ和HindⅢ消化接头, 形成两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端的双链cDNA。经Mini Column 纯化后, 收集300 bp 以上的双链cDNA 片段, 将其连接到带有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7 Select 10-3b 载体上, 经体外包装后, 以BL T5403 为受体菌构建了红莲水稻杂种F1花药的噬菌体展示文库。经测定显示, 该噬菌体展示文库容量为1.03×106 pfu/mL, 重组率为100%, 扩增后文库滴度为2.14×1012 pfu/mL。对随机挑取的100 个噬菌斑进行PCR 鉴定, 97%的插入片段大于300 bp。
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| 关 键 词： | 水稻 花药 噬菌体展示 文库构建 |
| 收稿时间： | 2007-11-23 |
| 修稿时间： | 2007年11月23 |
Construction of T7 phage display library from the anther of Honglian hybrid line of rice |
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| HU Chao-Feng,PENG Xiao-Jue,ZHOU Yang-Yong,TAN Yan-Ping,LI Shao-Qing,ZHU Ying-Guo.Construction of T7 phage display library from the anther of Honglian hybrid line of rice[J].Hereditas,2008,30(6):771-775. |
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| Authors: | HU Chao-Feng PENG Xiao-Jue ZHOU Yang-Yong TAN Yan-Ping LI Shao-Qing ZHU Ying-Guo |
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| Institution: | Key Laboratory of MOE for Plant Development Biology, College of Life Science, Wuhan University, Wuhan 430072, China. phenixfeng@yahoo.com.cn |
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| Abstract: | |
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