限制性核酸内切酶Bsp 631特性的研究

11型限制性核酸内切酶的发现和应用，革命性地推动了分子生物学和遗传工程的发展。不管从酶本身的理论研究或从工具酶的应用研究方面来说，都必须首先确定酶促反应系统的最适条件以及各种因素对酶活性的影响，但是目前关于这类酶促反应条件的确定，多数是根据定性实验和经验，很少是根据定量实验作动力学描述。限制性核酸内切酶Bsp 631是我国自己分离的菌种和发现的新酶Ci]。已测定其识别序列，并确定它是Pst I酶的异源同功酶。根据我们对这两个异源同功酶的比较研究，我们认为Bsp 631比PsA有较多的优点：酶含量较高，且比较稳定，易于纯化。因此，估计可用Bsp 631取代PstIo但对Bsp 631酶性质的研究，国内外尚未见报道。因此我们采用本实验室自己纯化的Bsp 631酶，用定量测活的方法，对其最适反应条件，二价阳离子及一价阳离子对其活性的影响，以及酶的Km值等进行了初步的研究，从而为今后对该酶的动力学研究结构分析及其作为工具酶的应用提供了必要的资料。