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一种新颖的棉铃虫单粒包埋核多角体病毒表达系统
引用本文:王汉中,黄弋,司艳红,方明刚,陈新文,Just M.Vlak,胡志红. 一种新颖的棉铃虫单粒包埋核多角体病毒表达系统[J]. 中国病毒学, 2002, 17(4): 319-325
作者姓名:王汉中  黄弋  司艳红  方明刚  陈新文  Just M.Vlak  胡志红
作者单位:1. 中国科学院武汉病毒所无脊椎动物病毒联合实验室,湖北武汉,430071
2. Labboratory of Virology, Wageningen University 6709 PD Wageningen, The Netherlands
基金项目:中科院中荷院级合作项目(97CDP010)、百人计划、创新工程重要方向性项目(kscx2-1-02, kscx2-301-09)、青年科学家小组项目;国家杰出青年基金(3002503)、国家自然科学基金(30070034);转基因植物专项基金(J00-A-003), 863项目(101-06-10-01; 2001AA14031).
摘    要:将含有低拷贝数的mini-F replicon、一个卡那霉素抗性基因和一个lacZα基因8.6kb的DNA片段经同源重组置换到棉铃虫核型多角体病毒基因组中的多角体蛋白基因内,构建了既能在E.coli内复制又可在昆虫细胞内复制形成完整的病毒粒子棉铃虫核型多角体病毒Bacmid(HaBacmid-HZ8).另外将HaSNPV的多角体蛋白基因和P10启动子序列取代pFastBacDual质粒上的AcMNPV的多角体启动子序列和P10启动子序列,构建插入HaSNPV多角体蛋白基因和 P10启动子序列的HapFastBacPhP10供体质粒.利用HapFastBacPhP10供体质粒将eGFP基因转位至HZ8的Tn7附着位点上,随后将含有eGFP基因的重组HaBacmid DNA转染至HZAm1细胞内.转染5d后,细胞核内能形成典型的多角体,在萤光显微镜下观察到细胞内显示出强烈的绿色萤光.结果证明我们构建的HaBac to Bcac 表达系统能有效的表达外源基因.

关 键 词:HaSNPV  表达  转位  细菌人造染色体
文章编号:1003-5125(2002)04-0319-07
修稿时间:2002-02-05

A Novel Expression System of Helicoverpa armigera single-nucleocapsid nucleopolydrovirus
Just M.Vlak. A Novel Expression System of Helicoverpa armigera single-nucleocapsid nucleopolydrovirus[J]. Virologica Sinica, 2002, 17(4): 319-325
Authors:Just M.Vlak
Abstract:
Keywords:HaSNPV
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