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APOBEC3A通过脱氨基作用抑制HBV复制
引用本文:陈彦猛,黄瑶,胡杰,胡源. APOBEC3A通过脱氨基作用抑制HBV复制[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(12): 8-14. DOI: 10.13523/j.cb.20151202
作者姓名:陈彦猛  黄瑶  胡杰  胡源
作者单位:重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室 重庆 400016
基金项目:国家自然科学基金(81471945)、重庆市科委自然科学基金(cstc2014jcyjA10075)资助项目
摘    要:目的:研究APOBEC3A抑制HBV复制的分子机制。方法:首先在肝癌细胞HuH7中过表达APOBEC3A,通过MTT法检测了APOBEC3A对细胞毒性的影响;通过免疫荧光检测了APOBEC3A在细胞中的定位,通过IP试验进一步证实了APOBEC3A与病毒颗粒的相互作用;并通过ELISA,特异性荧光定量PCR检测了HBV复制的参数包括上清中HBsAg,病毒核心颗粒中HBV DNA以及核内的cccDNA的表达水平;最后通过3D PCR方法分析了核心颗粒中HBV DNA脱氨基作用。结果:过表达APOBEC3A对HuH7细胞毒性没有显著性差异;APOBEC3A主要位于细胞核,但APOBEC3A可以与病毒颗粒结合,在逆转录环节对HBV复制发生抑制作用;共转染HBV复制质粒和APOBEC3A表达质粒后,细胞上清中HBsAg,核心颗粒中的HBV DNA以及核内的cccDNA均显著下降;最后通过3D PCR和克隆测序表明核心颗粒中的HBV DNA负链发生了大量的G-A突变,同时正链也发生了较多的C-T突变。结论:APOBEC3A可与病毒颗粒结合,在HBV复制的逆转录环节可作用于HBV单链,发生脱氨基作用,从而抑制HBV的复制。

关 键 词:APOBEC3A  脱氨基作用  乙型肝炎病毒  抑制  
收稿时间:2015-08-06

APOBEC3A Inhibited HBV Replication Dependent Its Deamination
CHEN Yan-meng,HUANG Yao,HU Jie,HU Yuan. APOBEC3A Inhibited HBV Replication Dependent Its Deamination[J]. China Biotechnology, 2015, 35(12): 8-14. DOI: 10.13523/j.cb.20151202
Authors:CHEN Yan-meng  HUANG Yao  HU Jie  HU Yuan
Abstract:
Keywords:Hepatitis B virus  Deamination  APOBEC3A  Inhibition  
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