表达量高、血凝活性好的H3N2流感病毒血凝素(HA)蛋白疫苗的筛选研究 |
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引用本文: | 杨姣姣,郑宁晨,张 婷,王志荣,许雪梅. 表达量高、血凝活性好的H3N2流感病毒血凝素(HA)蛋白疫苗的筛选研究[J]. 现代生物医学进展, 2023, 0(8): 1401-1404 |
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作者姓名: | 杨姣姣 郑宁晨 张 婷 王志荣 许雪梅 |
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作者单位: | 中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 北京 100005 |
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基金项目: | 中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目基金(2021-1-I2M-043);国家自然科学基金项目(31970867) |
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摘 要: | 摘要 目的:筛选表达量高、血凝活性好的H3N2流感病毒血凝素(HA)重组蛋白。方法:以A/MINNESOTA/41/2019(H3N2)毒株的HA为基础,将HA胞外区N端融合GP67信号肽,C端融合三聚化基序,分别构建HA胞外区全长及近膜区截短2个氨基酸的HA重组杆状病毒,并构建相应的不含三聚化基序的HA重组杆状病毒;经昆虫细胞表达,Western blot鉴定,亲和层析纯化后分析重组蛋白的血凝效价及稳定性。结果:四种HA重组蛋白均获得有效表达,其中HA胞外区全长融合三聚化基序的重组蛋白(HA-T)表达水平最高,经Strep tag亲和层析获得高度纯化,产量高达30 mg/L,Ethylene glycolbis交联分析显示为稳定的HA三聚体形式,血凝活性分析显示HA-T的活性最高,血凝效价为29,动态光散射显示HA-T在4℃放置3个月性质稳定。结论:HA-T表达量高、稳定性好、血凝活性高且易于纯化,研究结果为流感重组蛋白疫苗的研发策略提供了参考。
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关 键 词: | H3N2;血凝素(HA);重组蛋白疫苗 |
收稿时间: | 2022-10-28 |
修稿时间: | 2022-11-24 |
Screening of Hemagglutinin (HA) Protein Vaccine with High Expression and Good Hemagglutination Activity for H3N2 Influenza Virus |
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Abstract: | |
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Keywords: | H3N2 Hemagglutinin (HA) Recombinant protein vaccines |
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