| 新型抗菌肽Perinerin在大肠杆菌中的融合表达 |
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| 引用本文： | 周庆峰,李明月,李成伟,奚涛.新型抗菌肽Perinerin在大肠杆菌中的融合表达[J].生物学杂志,2009,26(2). |
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| 作者姓名： | 周庆峰 李明月 李成伟 奚涛 |
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| 作者单位： | 1. 商丘师范学院,河南商丘,476000
2. 中国药科大学生命科学学院,南京,210009 |
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| 摘 要： | 为了获得新型抗菌肽 perinerin在大肠杆菌中的高效和可溶表达,实验首先采用SOE 法(重叠 PCR 法)获得的 perinerin 基因序列,对目的基因密码子优化,然后将其连接到 pET32a 载体中获得重组表达载体 pET32a-PEN,通过改变诱导时间和温度、诱导剂 IPTG 浓度以及诱变工程菌株等条件和方法,观察重组蛋白的表达效果,并运用金属螯合层析对融合蛋白进行纯化.SDS-PAGE 显示重组菌诱导后表达的融合蛋白分子量约为 26kD,采用变异重组菌株 MUT 3诱导表达,在 2×YT 培养基培养条件下,30 ℃诱导4 h 可获得高效表达的 perinerin 融合蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的 50 % 左右,重组蛋白主要以可溶性表达形式存在,可溶性产物最高可达重组蛋白总表达量的 60 %.融合蛋白运用金属螯合层析一步纯化,纯度可达 90 % 以上.
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| 关 键 词： | 融合蛋白 诱导表达 优化 |
The fusion expression of a novel antimicrobial peptide perinerin in Escherichia coli |
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| ZHOU Qing-feng,LI Ming-yue,LI Cheng-wei,XI Tao.The fusion expression of a novel antimicrobial peptide perinerin in Escherichia coli[J].Journal of Biology,2009,26(2). |
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| Authors: | ZHOU Qing-feng LI Ming-yue LI Cheng-wei XI Tao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | perinerin |
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