| 表达barnase基因的重组棉铃虫核型多角体病毒的构建及其杀虫活性研究 |
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| 引用本文： | 朱应,齐义鹏,刘映乐,朱反修.表达barnase基因的重组棉铃虫核型多角体病毒的构建及其杀虫活性研究[J].中国生物化学与分子生物学报,2000,16(2):169-177. |
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| 作者姓名： | 朱应 齐义鹏 刘映乐 朱反修 |
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| 作者单位： | 武汉大学病毒研究所，武汉 430072 |
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| 基金项目： | 国家九五攻关项目(96001-02-04-03)和国家自然科学基金资助课题(39470398) |
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| 摘 要： | 将含有 barnase基因与杆状病毒多角体基因 ( ph)的重组转座载体 p Fb- Bar在大肠杆菌中与含有棉铃虫核型多角体病毒 ( Ha NPV)的穿梭载体 Hanpvid转座并提取重组穿梭载体 DNA转染棉铃虫细胞 ,得到重组棉铃虫病毒 r Ha- Bar.其分子杂交证明 ,昆虫细胞中有 r Ha- Bar的 bar基因转录本存在 ,并能表达产生 33k D的多角体蛋白和 1 2 k D的 barnase.在平板上 ,barnase能降解RNA,出现清晰的降解圈 .r Ha- Bar对三龄棉铃虫幼虫的毒力比野生型 Ha NPV的 LD50 减少 2 0 % ,LT50 减少 30 % .用 barnase的拮抗基因 barstar构建了具有 Neo抗性、并能稳定表达 barstar的棉铃虫转化细胞 AM1 - NB.以携带 barnase基因的重组病毒 r Ha- Bar分别感染转化细胞和正常细胞 ,48h子代病毒在转化细胞中的产量比在正常细胞中高 2 3倍 ,72 h高 1 60倍 .
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| 关 键 词： | Barnase基因 Barstar基因 转化细胞系 转座 重组棉铃虫核型多角体病毒 |
| 收稿时间： | 2000-04-20 |
| 修稿时间： | 1999年6月4日 |
Construction of a Recombinant Heliothis armigera Nuclear Polyhedrosis Virus Expressing Barnase Gene and its Pest killing Activity |
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| ZHU Ying,QI Yi peng,LIU Ying le,ZHU Fan xiu.Construction of a Recombinant Heliothis armigera Nuclear Polyhedrosis Virus Expressing Barnase Gene and its Pest killing Activity[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2000,16(2):169-177. |
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| Authors: | ZHU Ying QI Yi peng LIU Ying le ZHU Fan xiu |
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| Institution: | (Institute of Virology,Wuhan University,Wuhan 430072,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Barnase gene Barstar gene Transformed cell line Transposition Recombinant Heliothis armigera nuclear polyhedrosis virus |
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