| 人组蛋白α-氨基乙酰基转移酶Nat11表达纯化、晶体生长及底物结合研究 |
| |
| 引用本文： | 黄嘉欣,李海涛. 人组蛋白α-氨基乙酰基转移酶Nat11表达纯化、晶体生长及底物结合研究[J]. 生物技术通报, 2014, 0(11) |
| |
| 作者姓名： | 黄嘉欣 李海涛 |
| |
| 作者单位： | 清华大学医学院基础医学系,北京,100086 |
| |
| 基金项目： | 科技部“973”项目，2012教育部新世纪优秀人才支持计划 |
| |
| 摘 要： | α-氨基乙酰基转移酶11(Nat11)催化组蛋白H4和H2A氨基端乙酰化修饰,发挥着重要的表观遗传调控功能。将人Nat11基因构建到原核表达载体p SUMO中,转化入大肠杆菌BL21(DE3)进行重组表达。通过镍柱亲和层析等一系列体外纯化步骤,获得高纯度Nat11。利用等温滴定量热法(ITC),测得Nat11与底物多肽微摩尔量级结合常数。利用质谱技术,发现纯化后的Nat11结合有大肠杆菌内源产生的乙酰辅酶A或辅酶A,在ITC滴定过程中可以产生对多肽底物的乙酰化修饰,表明纯化获得的Nat11在溶液中具有酶活力。随后,对Nat11进行晶体生长研究,通过初筛优化获得蛋白截短体及底物-酶融合蛋白单晶。
|
| 关 键 词： | α-氨基乙酰基转移酶11 重组蛋白表达 蛋白聚集 酶-底物结合 晶体生长 |
Expression,Crystallization and Substrate Binding Studies of Human Histone N-terminal Acetyltransferase Nat11 |
| |
| Huang Jiaxin,Li Haitao. Expression,Crystallization and Substrate Binding Studies of Human Histone N-terminal Acetyltransferase Nat11[J]. Biotechnology Bulletin, 2014, 0(11) |
| |
| Authors: | Huang Jiaxin Li Haitao |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Alpha-amino acetyltransferase 11 Recombinant protein expression Protein aggregation Enzyme-substrate binding Crystallization |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
