| 大鼠HO-1表达质粒构建、活力检测及抗HUVEC凋亡的作用研究 |
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| 引用本文： | 夏振炜,齐奇,张雪洪,申庆祥,李云珠,俞善昌.大鼠HO-1表达质粒构建、活力检测及抗HUVEC凋亡的作用研究[J].分子细胞生物学报,2005,38(5):441-446. |
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| 作者姓名： | 夏振炜 齐奇 张雪洪 申庆祥 李云珠 俞善昌 |
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| 作者单位： | 夏振炜（上海第二医科大学附属瑞金医院,上海,200025）
齐奇（上海交通大学生命科学技术学院,上海,200030）
张雪洪（上海交通大学生命科学技术学院,上海,200030）
申庆祥（上海市计划生育科学研究所,上海,200032）
李云珠（上海第二医科大学附属瑞金医院,上海,200025）
俞善昌（上海第二医科大学附属瑞金医院,上海,200025） |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（批准号：30170988）
上海市教委资助项目（批准号：03BZ04）
上海交大-二医大合作基金~~ |
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| 摘 要： | 异种移植排斥反应的主要特征为内皮细胞发生Ⅱ型激活,引起黏附分子、细胞因子和前促凝分子等基因高表达,造成血管收缩、白细胞黏附、激活、聚集和血栓形成,最终导致内皮细胞凋亡。保护基因HO-1通过抑制前炎症反应及免疫调抑作用以保护异种移植器官。因此,通过构建含剪切的野生型大鼠HO-1 cDNA的表达型质粒,用DOTAP包裹转入HUVEC中表达,测定表达量及表达产物活性;采用TNF-α诱导细胞凋亡,以及Heme和SnPP分别刺激细胞,诱导和抑制细胞内HO-1表达量,流式细胞仪测定细胞凋亡率,明确HO-1的抗细胞凋亡作用。结果显示HO-1在HUVEC中高度表达,活力为对照组5倍;TNF-α诱导细胞凋亡,但Heme处理后细胞凋亡率下降至20%以下,而SnPP处理后细胞凋亡率显著上升,最高达到95%以上,并且HO-1基因表达抑制时细胞凋亡率是诱导时的5-20倍。本实验表明Heme处理后HO-1表达上调,具有显著抗细胞凋亡作用,细胞凋亡率与HO-1表达量呈负相关,提示HO-1通过抑制细胞凋亡,对细胞有保护作用。
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| 关 键 词： | 血红素加氧酶-1 肿瘤坏死因子-α 血红素 锡-原卟啉 细胞凋亡 |
| 修稿时间： | 2005年1月19日 |
THE STUDY ON THE CONSTRUCTION OF EXPRESSION PLASMID CONTAINING rHO-1 cDNA, ANALYSIS OF rHO-1 ACTIVITY AND FUNCTION OF ANTI-APOPTOSIS IN HUVEC |
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