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米曲霉酸性蛋白酶基因在毕赤酵母中的异源表达及酶学性质
引用本文:岳晓平,陈朋,朱玥明,曾艳,刘汉民,刘红彦,王敏,孙媛霞.米曲霉酸性蛋白酶基因在毕赤酵母中的异源表达及酶学性质[J].生物工程学报,2019,35(3):415-424.
作者姓名:岳晓平  陈朋  朱玥明  曾艳  刘汉民  刘红彦  王敏  孙媛霞
作者单位:1 天津科技大学 生物工程学院,天津 300457;2 中国科学院天津工业生物技术研究所,天津 300308,2 中国科学院天津工业生物技术研究所,天津 300308,2 中国科学院天津工业生物技术研究所,天津 300308,2 中国科学院天津工业生物技术研究所,天津 300308,3 中恩 (天津) 医药科技有限公司,天津 300308,3 中恩 (天津) 医药科技有限公司,天津 300308,1 天津科技大学 生物工程学院,天津 300457,2 中国科学院天津工业生物技术研究所,天津 300308
基金项目:国家重点研发计划 (No. 2018YFD0400403),天津市科技计划项目 (No. 16PTYJNC00010),天津市科技计划项目 (No. 15PTCYSY00020)资助。
摘    要:酸性蛋白酶作为一类重要的天冬氨酸蛋白酶,被广泛应用于食品、医药和皮革等领域。为推动酸性蛋白酶的研究及应用,通过对发酵豆制品样品进行宏基因组测序,从中获得米曲霉酸性蛋白酶基因pepA,在毕赤酵母GS115中进行异源表达,并对重组酶PepA进行酶学性质分析。结果显示毕赤酵母发酵上清液中酸性蛋白酶的活性为50.62 U/mL。SDS-PAGE验证PepA的分子量约为50 kDa,且发酵上清液几乎无杂蛋白。PepA的最适pH值为4.5,最适温度为50℃,Mn~(2+)和Cu~(2+)对其具有激活作用,而Fe~(3+)、Fe~(2+)与Ca~(2+)则具有抑制作用。上述研究结果可为米曲霉酸性蛋白酶的异源表达及其相关工业应用提供指导。

关 键 词:米曲霉,酸性蛋白酶,毕赤酵母,异源表达,酶学性质
收稿时间:2018/8/2 0:00:00

Heterologous expression and characterization of Aspergillus oryzae acidic protease in Pichia pastoris
Xiaoping Yue,Peng Chen,Yueming Zhu,Yan Zeng,Hanmin Liu,Hongyan Liu,Min Wang and Yuanxia Sun.Heterologous expression and characterization of Aspergillus oryzae acidic protease in Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Biotechnology,2019,35(3):415-424.
Authors:Xiaoping Yue  Peng Chen  Yueming Zhu  Yan Zeng  Hanmin Liu  Hongyan Liu  Min Wang and Yuanxia Sun
Institution:1 College of Bioengineering, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China;2 Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China,2 Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China,2 Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China,2 Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China,3 Sinofn (Tianjin) Pharmacy Technology Co. Ltd., Tianjin 300308, China,3 Sinofn (Tianjin) Pharmacy Technology Co. Ltd., Tianjin 300308, China,1 College of Bioengineering, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China and 2 Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China
Abstract:
Keywords:Aspergillums oryzae  acidic protease enzyme  Pichia pastoris  heterologous expression  enzymatic properties
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