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缺失宿主Vta1蛋白的MIT结构域对杆状病毒AcMNPV复制的影响
引用本文:孙雨,李玉英,王司军,于乾龙,岳琦,李朝飞.缺失宿主Vta1蛋白的MIT结构域对杆状病毒AcMNPV复制的影响[J].微生物学报,2019,59(2):247-257.
作者姓名:孙雨  李玉英  王司军  于乾龙  岳琦  李朝飞
作者单位:西北农林科技大学植物保护学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学植物保护学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学植物保护学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学植物保护学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学植物保护学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学植物保护学院, 陕西 杨凌 712100
基金项目:国家自然科学基金面上项目(31672082)
摘    要:【目的】克隆草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)Vta1基因,检测Vta1在苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)复制中的作用。【方法】利用反转录-PCR与PCR方法筛选草地贪夜蛾Vta1基因及缺失Vta1N-端MIT结构域的突变体并构建其瞬时表达质粒,通过转染Sf9细胞检测表达;构建Vta1及其突变体的双分子荧光互补表达质粒,并通过瞬时转染检测其与Vps4及ESCRT-III亚基Vps46与Vps60的相互作用;共转染gp64与Vta1及其突变体瞬时表达质粒,检测瞬时表达Vta1突变体对AcMNPV出芽型病毒产量及病毒基因启动子指导报告基因表达的影响。【结果】获得了草地贪夜蛾Vta1基因。氨基酸序列相似性分析表明,昆虫、酵母与人类Vta1同源蛋白的相似性分别约为20%与50%。Western blotting分析表明GFP标签的Vta1及其突变体均能在瞬时转染的Sf9细胞中表达。双分子荧光互补分析发现,缺失第1个或第2个MIT结构域显著降低Vta1突变体与Vps4、Vps46或Vps60的相互作用。此外,瞬时表达Vta1突变体显著降低了AcMNPV感染性出芽型病毒的产量,但并未影响AcMNPVie1基因早期启动子和p6.9基因晚期启动子指导的LacZ和GUS报告基因的表达。【结论】Vta1可能参与杆状病毒AcMNPV子代病毒粒子的组装和/或出芽释放过程。

关 键 词:草地贪夜蛾  内吞分选转运复合体  Vta1  苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒
收稿时间:2018/3/15 0:00:00
修稿时间:2018/4/11 0:00:00

Effects of deletion of MIT domains of host Vta1 on replication of Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus
Yu Sun,Yuying Li,Sijun Wang,Qianlong Yu,Qi Yue and Zhaofei Li.Effects of deletion of MIT domains of host Vta1 on replication of Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus[J].Acta Microbiologica Sinica,2019,59(2):247-257.
Authors:Yu Sun  Yuying Li  Sijun Wang  Qianlong Yu  Qi Yue and Zhaofei Li
Institution:College of Plant Protection, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Plant Protection, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Plant Protection, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Plant Protection, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Plant Protection, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China and College of Plant Protection, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China
Abstract:
Keywords:Spodoptera frugiperda  ESCRT  Vta1  AcMNPV
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