| 雌激素受体β真核表达载体的构建及其转录活性 |
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| 引用本文： | 李勤操,何宝祥,杨智洪,丁丽华,李杰萍,张浩,袁斌,叶棋浓.雌激素受体β真核表达载体的构建及其转录活性[J].生物技术通讯,2008,19(5):673-675. |
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| 作者姓名： | 李勤操 何宝祥 杨智洪 丁丽华 李杰萍 张浩 袁斌 叶棋浓 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100850;广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530005
2. 广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530005
3. 军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，军队医学科研项目 |
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| 摘 要： | 目的：构建雌激素受体（ER）β的哺乳动物细胞表达载体,并检测其转录活性。方法：利用PCR扩增带有Flag标签的人类ERβ全长编码序列,将扩增片段克隆到哺乳动物细胞表达载体pIRESpuro2中,得到重组质粒pIRESpuro2-Flag-ERβ;用Western blot鉴定Flag-ERβ重组蛋白在人胚肾293T细胞中的表达;用含雌激素应答元件（ERE）的报告基因系统检测Flag-ERβ的转录活性。结果：构建了pIRESpuro2-Flag-ERβ重组质粒,其介导的融合蛋白在293T细胞中得到表达,并可以激活含ERE的报告基因的表达。结论：ERβ高效真核表达载体的构建,为进一步研究ERβ在乳腺癌等疾病中的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 雌激素受体β 转录活性 真核表达载体 |
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