| Angioarrestin(hARP1)C端FD区的克隆、表达及其免疫活性鉴定 |
| |
| 作者单位： | 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 上海200433 |
| |
| 摘 要： | Angioarrestin是一种具有潜在应用价值的肿瘤血管形成抑制因子.利用DNA重组法构建了angioarrestinC端hFDcDNA和麦芽糖结合蛋白(MBP)重组原核表达质粒pMAL-C2-hFD.将重组质粒转入大肠杆菌E.coliBL21(DE3),经0.3mmol/LIPTG在37℃条件下诱导表达4h,SDS-PAGE检测,融合蛋白表达量约占细菌总蛋白的20%.Western印迹证实,目的蛋白N端带有MBP标签.取表达上清纯化、透析、浓缩并冻干,以此为抗原免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体.此多抗可以与pET-22b( )表达系统获得的hFD重组蛋白发生良好的抗原抗体反应,ELISA检测多抗效价达1∶10240.实验证明:通过基因重组可获得angioarrestinC端hFD在大肠杆菌中的高效表达蛋白,且该蛋白具有较高的免疫活性.以此为抗原制备的抗angioarrestin多克隆抗体为深入研究angioarrestin提供了材料.
|
| 关 键 词： | angioarrestin MBP 融合蛋白 大肠杆菌表达 多克隆抗体 |
Cloning,Expression and Polyclonal Antibody Preparation of C-terminal FD Domain of Human Angioarrestin(hARP1) |
| |
| SUN Ming-Juan,WANG Liang-Hua,DONG Xiao-Yi,ZONG Ying,GAO Yun,JIAO Bing-Hua. Cloning,Expression and Polyclonal Antibody Preparation of C-terminal FD Domain of Human Angioarrestin(hARP1)[J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 2007, 0(2) |
| |
| Authors: | SUN Ming-Juan WANG Liang-Hua DONG Xiao-Yi ZONG Ying GAO Yun JIAO Bing-Hua |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | angioarrestin MBP fusion protein E.coli expression polyclonal antibody |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
