利用IgA蛋白酶β结构域为骨架构建细菌表面展示随机肽库 |
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作者姓名: | 辛忠涛 茆灿泉 高亚萍 赵安 张杰 薛沿宁 凌世淦 柳川 |
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作者单位: | 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850 |
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摘 要: | 以IgA蛋白酶β结构域为骨架构建细菌表面展示随机肽库。设计合成两条寡核苷酸双链,链1含有一个随机编码序列(NNK)10,其3'端可与链2互补。通过两条链的退火、延伸、酶切、回收后与酶切、去磷酸化的载体以最佳连接比连接,采用酚∶氯仿抽提去除残留的连接酶,分批进行电转化,获得一库容量为5×106的随机肽库。随机挑选10个克隆进行测序,结果显示所构建肽库的基本框架与预期设计相符,四个寡核苷酸出现的频率也与理论值相接近,表明所构建的随机肽库是成功的。
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关 键 词: | IgA蛋白酶 β结构域 构建 细菌表面展示 随机肽库 |
文章编号: | 1009-0002(2002)06-0420-04 |
修稿时间: | 2002-05-24 |
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