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过表达Grx1抑制HEK293T细胞中H2O2诱导的p38MAPK信号通路
引用本文:邹朝霞,李强,刘莹莹,吴莉芳,张春晶,房绍红,周宏博.过表达Grx1抑制HEK293T细胞中H2O2诱导的p38MAPK信号通路[J].中国生物化学与分子生物学报,2008,24(6).
作者姓名:邹朝霞  李强  刘莹莹  吴莉芳  张春晶  房绍红  周宏博
基金项目:黑龙江省自然科学基金 , 黑龙江省卫生厅科研项目 , 哈尔滨医科大学青年基金
摘    要:谷氧还蛋白1(glutaredoxin1, Grx1)是细胞内一种重要的巯基-二硫键氧化还原酶,在细胞内氧化还原状态的调控及抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要作用.为进一步探讨Grx1的抗氧化机制,本实验将重组质粒pcDNA3.1(+)-hGrx1瞬时转染HEK293T细胞,经RT-PCR和Western印迹验证,细胞转染后实现了Grx1的过表达;以不同浓度H2O2为损伤因素,建立细胞氧化应激模型,检测过表达Grx1后细胞存活率,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率的变化,观察过表达Grx1后细胞的抗氧化能力;用终浓度100μmol/L H2O2作用于细胞,利用Western印迹检测120min内HEK293T细胞中p38MAPK磷酸化水平.实验结果表明,HEK293T细胞过表达Grx1后,缓解了细胞的氧化应激损伤;转染空载体组细胞p38MAPK磷酸化水平在H2O2刺激后5min开始升高,15min达到最高值,并可维持至120min左右;而过表达Grx1组细胞p38MAPK磷酸化水平在H2O2刺激后各时间段没有明显改变,提示Grx1通过抑制H2O2诱导的p38MAPK信号通路激活发挥其抗氧化作用.

关 键 词:谷氧还蛋白  HEK293T细胞  氧化应激  p38MAPK  瞬时转染  表达  于细胞  信号通路  Cells  Induced  Signal  Transduction  Pathway  MAPK  Activation  氧化作用  激活  时间段  刺激  转染空载体  氧化应激损伤  结果  水平  磷酸化  利用  氧化能力  变化

Grx1 Overexpression Inhibited Activation of P38 MAPK Signal Transduction Pathway Induced by H2O2 in HEK293T Cells
ZOU Chao-Xia,LI Qiang,LIU Ying-Ying,WU Li-Fang,ZHANG Chun-Jing,FANG Shao-Hong,ZHOU Hong-Bo.Grx1 Overexpression Inhibited Activation of P38 MAPK Signal Transduction Pathway Induced by H2O2 in HEK293T Cells[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2008,24(6).
Authors:ZOU Chao-Xia  LI Qiang  LIU Ying-Ying  WU Li-Fang  ZHANG Chun-Jing  FANG Shao-Hong  ZHOU Hong-Bo
Abstract:
Keywords:
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