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肺炎链球菌体内诱导基因的筛选及初步鉴定
引用本文:孟江萍,尹一兵,张雪梅,黄远帅,蓝锴.肺炎链球菌体内诱导基因的筛选及初步鉴定[J].微生物学报,2006,46(4):537-541.
作者姓名:孟江萍  尹一兵  张雪梅  黄远帅  蓝锴
作者单位:重庆医科大学医学检验系,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:为筛选鉴定肺炎链球菌宿主体内诱导的基因,寻找潜在的抗生素作用靶点和疫苗候选者,应用体内表达技术,以肺炎链球菌荚膜合成的关键基因galU作为体内报告基因,利用其缺陷体不能合成荚膜多糖,从而不能在宿主体内存活的特点,筛选鉴定肺炎链球菌体内诱导基因。首先,把肺炎链球菌基因组DNA的随机酶切片段(200~500bp)克隆到含有体内、体外双重报告基因(galU-lacZ)的报告载体pEVP3-galU的BglⅡ位点,将获得的质粒库转化肺炎链球菌galU缺陷菌株,得到肺炎链球菌体内启动子诱捕文库,将此文库去感染BALB/c小鼠,经过两轮体内筛选,在涂布有X-gal的TSA血清平板上得到了165个白色菌落,对插入的随机片段进行测序及生物信息学分析,共证实15个不同的体内诱导基因片段,8个为单独的ORF,7个为含有多个ORFs的操纵子结构,它们分别参与细菌在宿主体内的定植与粘附、能量代谢、物质转运、转录调节、DNA复制与重组、细胞壁合成等,另外还包括功能不明的假想蛋白。其中部分ORFs可能与细菌毒力相关,可以作为候选疫苗和药物的靶标。

关 键 词:肺炎链球菌  体内诱导基因  体内表达技术  荚膜多糖
文章编号:0001-6209(2006)04-0537-05
收稿时间:2005-10-08
修稿时间:2005-10-082006-03-29

Screen and idlentification of Streptocococcus pneumoniae genes specifically induced in host
MENG Jiang-ping,YIN Yi-bing,ZHANG Xue-mei,HUANG Yuan-shuai,LAN Kai.Screen and idlentification of Streptocococcus pneumoniae genes specifically induced in host[J].Acta Microbiologica Sinica,2006,46(4):537-541.
Authors:MENG Jiang-ping  YIN Yi-bing  ZHANG Xue-mei  HUANG Yuan-shuai  LAN Kai
Institution:Key Laboratory of Laboratory Medical Diagnostics of Ministry of Education, Department of Laboratory Medicine in Chongqing University of Medical Sciences, Chongqing 400016, China
Abstract:
Keywords:Streptococcus pneumoniae  in vivo expression technology  in vivo induced gene  Capsular polysaccharide
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