| 地衣芽胞杆菌ATCC9945A中γ-聚谷氨酸降解酶基因的克隆、表达及降解性能鉴定 |
| |
| 引用本文： | 王计伟,施庆珊,欧阳友生,胡文锋,陈仪本.地衣芽胞杆菌ATCC9945A中γ-聚谷氨酸降解酶基因的克隆、表达及降解性能鉴定[J].生物技术,2012,22(1):13-18. |
| |
| 作者姓名： | 王计伟 施庆珊 欧阳友生 胡文锋 陈仪本 |
| |
| 作者单位： | 1. 广东省微生物研究所,广东省菌种保藏与应用重点实验室,广东省微生物应用新技术公共实验室,广东广州510070;华南农业大学食品学院,广东广州510642
2. 广东省微生物研究所,广东省菌种保藏与应用重点实验室,广东省微生物应用新技术公共实验室,广东广州510070
3. 华南农业大学食品学院,广东广州,510642 |
| |
| 基金项目： | 广东省科技计划项目，广州市科技计划项目(应用基础研究专项) |
| |
| 摘 要： | 目的:验证在地衣芽胞杆菌ATCC9945A中存在着γ-聚谷氨酸降解酶基因(ywtD),为下一步解决在γ-聚谷氨酸微生物发酵合成过程中产物γ-PGA降解的技术性难题提供依据。方法:通过在pET-28b(+)大肠杆菌表达系统克隆表达地衣芽孢杆菌ATCC9945A中的ywtD基因,对诱导表达条件进行优化,采用SDS-PAGE和Western Blot方法检测目的蛋白的表达,并体外酶解实验验证其活性。结果:PCR扩增得到了一个1 245bp的基因片段,预期编码414个氨基酸,诱导表达后得到一个分子量大小约为45.6 kDa的表达产物。Western Blot分析结果表明ywtD基因得到了有效表达。体外酶解实验表明该表达产物具有降解γ-PGA的活性。结论:证明在地衣芽胞杆菌ATCC9945A中存在着γ-聚谷氨酸降解酶基因。
|
| 关 键 词： | 地衣芽孢杆菌ATCC9945A γ-PGA降解酶基因 克隆表达 降解性能 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
