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杆状病毒P6.9蛋白的表达及自身互作研究
引用本文:梁昌镛,张高瞻,赵淑玲,李敏,戴雪娟,侯艳玲.杆状病毒P6.9蛋白的表达及自身互作研究[J].生物技术,2012,22(3):27-30.
作者姓名:梁昌镛  张高瞻  赵淑玲  李敏  戴雪娟  侯艳玲
作者单位:扬州大学生物科学与技术学院,江苏扬州,225009
摘    要:目的:在大肠杆菌中表达苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒P6.9蛋白并制备抗体,研究P6.9的自身互作。方法:用PCR方法扩增p6.9基因,将其分别克隆到原核表达载体pMAL-c2x、pGEX-4T-1、pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。选取可溶性较好的融合蛋白纯化后免疫家兔制备抗体。然后利用该抗体进行Western blot检测、分析P6.9的自身互作。结果:构建了pMAL-P6.9、pGEX-P6.9、pET-P6.9三种原核表达质粒,分别在大肠杆菌中经IPTG诱导表达产生了与预期分子量相符的MBP-P6.9(49.4kDa)、GST-P6.9(32.9kDa)、HIS-P6.9(12.5kDa)融合蛋白。制备了P6.9的多克隆抗体,能与P6.9蛋白发生特异反应。Pull-down结果表明P6.9自身互作。结论:获得了兔抗P6.9的多克隆抗体,为深入研究P6.9的功能提供了检测工具。证明了P6.9之间的互作,说明该蛋白功能的发挥可能是通过多聚体起作用的。

关 键 词:苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒  P6.9蛋白  原核表达  抗体  Pulldown

Prokaryotic Expression and Self- interaction Study of Autographa californica Multiple Nucleopolyhedrovirus P6.9
LIANG Chang-yong , ZHANG Gao-zhan , ZHAO Shu-ling , LI Min , DAI Xue-juan , HOU Yan-ling.Prokaryotic Expression and Self- interaction Study of Autographa californica Multiple Nucleopolyhedrovirus P6.9[J].Biotechnology,2012,22(3):27-30.
Authors:LIANG Chang-yong  ZHANG Gao-zhan  ZHAO Shu-ling  LI Min  DAI Xue-juan  HOU Yan-ling
Institution:(College of Bioscience and Biotechnology,Yangzhou University,Yangzhou 225009,China)
Abstract:
Keywords:
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