| 极端嗜盐古菌质粒pSCM201衍生穿梭表达载体的构建及应用 |
| |
| 引用本文： | 苗荻,孙超岷,向华.极端嗜盐古菌质粒pSCM201衍生穿梭表达载体的构建及应用[J].微生物学报,2009,49(8):1040-1047. |
| |
| 作者姓名： | 苗荻 孙超岷 向华 |
| |
| 作者单位： | 中国科学院微生物研究所,微生物资源前期开发国家重点实验室,北京100101 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金（30671141），国家“863计划”（2006AA09Z401） |
| |
| 摘 要： | 摘要：【目的】利用有自主知识产权的嗜盐古菌θ型复制质粒和启动子，构建在极端嗜盐古菌模式菌株西班牙盐盒菌（Haloarcula hispanica）中方便使用、功能完善的基因表达载体。【方法】以pSCM201的最小复制子为基础，通过引入莫维诺林抗性基因，大肠杆菌质粒复制子以及氨苄抗性基因，构建了一个新的嗜盐古菌-大肠杆菌穿梭载体。利用定点突变和末端补平法依次将其中多余的酶切位点去除后，再添加hsp5启动子核心序列、人工合成的多克隆位点以及蛋白纯化标签His?Tag等重要元件成功构建了嗜盐古菌表达载体pSCM307。将报告基因bgaH插入到该载体的多克隆位点中并转化H. hispanica AS2049，通过X-gal平板筛选和β-半乳糖苷酶酶活实验检测pSCM307的表达能力。【结果】pSCM307具有独立的自主复制能力，其多克隆位点方便实用，报告基因bgaH在hsp5启动子控制下实现了高效表达。【结论】成功构建了嗜盐古菌领域中第一个方便使用的基因表达载体。
|
| 关 键 词： | 关键词：嗜盐古菌 pSCM201 穿梭载体 表达载体 |
| 收稿时间： | 2009/3/16 0:00:00 |
| 修稿时间： | 4/3/2009 12:00:00 AM |
Construction and application of a novel shuttle expression vector based on haloarchaeal plasmid pSCM201 |
| |
| Di Miao,Chaomin Sun and Hua Xiang.Construction and application of a novel shuttle expression vector based on haloarchaeal plasmid pSCM201[J].Acta Microbiologica Sinica,2009,49(8):1040-1047. |
| |
| Authors: | Di Miao Chaomin Sun and Hua Xiang |
| |
| Institution: | State Key Laboratory of Microbial Resources, Institute of Microbiology, Chinese Academy of
Sciences, Beijing 100101, China;State Key Laboratory of Microbial Resources, Institute of Microbiology, Chinese Academy of
Sciences, Beijing 100101, China;State Key Laboratory of Microbial Resources, Institute of Microbiology, Chinese Academy of
Sciences, Beijing 100101, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Keywords: haloarchaea pSCM201 shuttle vector expression vector |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《微生物学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《微生物学报》下载免费的PDF全文 |
