| 绿色荧光蛋白基因mRNA反义寡核苷酸的筛选和应用 |
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| 引用本文： | 毛建平,王全会,施水兰,袁国刚,左刚,崔玉芳,毛秉智.绿色荧光蛋白基因mRNA反义寡核苷酸的筛选和应用[J].中国生物化学与分子生物学报,2005,21(4):529-536. |
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| 作者姓名： | 毛建平 王全会 施水兰 袁国刚 左刚 崔玉芳 毛秉智 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850
2. 解放军476医院免疫学研究室,福州,350002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30271546)，北京市自然科学基金(No.5033020)资助项目.~~ |
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| 摘 要： | 基因mRNA的靶点筛选是设计反义寡核苷酸的关键.建立了PARASS(polyAanchoredRNAaccessiblesitesscreening)方法,即通过在mRNA末端引入polyA,与生物素标记的polyT退火结合,将其同链亲和素磁珠混合,使mRNA通过3’末端得到固定,保持mRNA的自然伸展和折叠,与寡核苷酸文库杂交筛选mRNA的结合靶点.PARASS筛选获得了绿色荧光蛋白(GFP)mRNA的3个反义寡核苷酸结合靶点,据其设计了多条反义寡核苷酸,与对照组相比,体外RNaseH分析显示3个靶点均为有效,在HeLa细胞内针对靶点的反义寡核苷酸能抑制GFP的表达,得到了Northern印迹结果支持.PARASS对反义寡核苷酸药物设计具有应用价值.
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| 关 键 词： | mRNA 反义寡核苷酸 靶点 PARASS GFP |
| 收稿时间： | 2005-08-20 |
| 修稿时间： | 2004年8月30日 |
Application of Antisense Oligonucleotides Designed to Screened Green Fluorescence Protein mRNA Accessible Sites |
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| MAO Jian-ping,WANG Quan-hui,SHI Shui-Lan,YUAN Guo-Gang,ZUO Gang,CUI Yu-fang,MAO Bing-zhi.Application of Antisense Oligonucleotides Designed to Screened Green Fluorescence Protein mRNA Accessible Sites[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2005,21(4):529-536. |
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| Authors: | MAO Jian-ping WANG Quan-hui SHI Shui-Lan YUAN Guo-Gang ZUO Gang CUI Yu-fang MAO Bing-zhi |
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| Institution: | ( 1)Department of Immunology, Institute of Radiation Medicine, Beijing 100850, China; 2) Department of Immunology, PLA 476 Hospital, FuZhou 350002, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | mRNA antisense oligonucleotide target site PARASS GFP |
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