鸡肝二氢叶酸还原酶在盐酸胍溶液中构象的序变与激活 |
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引用本文: | 范映辛,居鸣,周筠梅,邹承鲁.鸡肝二氢叶酸还原酶在盐酸胍溶液中构象的序变与激活[J].中国科学C辑,1997,27(3):204. |
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作者姓名: | 范映辛 居鸣 周筠梅 邹承鲁 |
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作者单位: | 中国科学院生物物理研究所 生物大分子国家重点实验室,北京100101 |
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摘 要: | 用蛋白质内源荧光、疏水荧光探针TNS及蛋白酶K限制性酶解等方法研究了二氢叶酸还原酶在盐酸胍变性过程中的构象变化及动力学,并与活力变化进行了比较.TNS可以监测到与激活同步的构象变化;盐酸胍浓度大于0.75mol/L时,二氢叶酸还原酶被蛋白酶K水解速度增大;当盐酸胍浓度大于1.2mol/L时,才能监测到酶分子整体构象的变化.以上结果表明二氢叶酸还原酶在盐酸胍溶液中的变性并不符合标准的二态模型,而是先经历构象逐步松散的序变过程,然后发生协同的构象伸展.二氢叶酸还原酶在低浓度盐酸胍溶液中的激活是由于酶活性部位构象的微小变化引起的.酶活性部位构象的变化虽然降低了酶与废物的结合能力,但加快了酶促反应限速步骤,即底物解离速度而使酶活力升高.
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关 键 词: | 二氢叶酸还原酶 盐酸胍 激活 蛋白质去折叠 |
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