一种新型免疫PCR基因探针的构建及其在诊断中的初步研究 |
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作者姓名: | 乔生军 吴自荣 戚蓓静 王林发 |
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作者单位: | 1.华东师范大学生物系分子生物学研究室 上海200062 2.AustralianAnimalHealthLaboratory Geelong,VIC,3220Australia |
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摘 要: | 利用叶绿素分子 (chlorophyll)作为共价连接蛋白质与核酸的中间分子 ,构建了甲胎蛋白 (α fetoprotein ,AFP)抗体的基因探针 ,并用构建的基因探针通过免疫PCR对AFP进行了诊断的初步研究 .结果表明 ,其检测灵敏度比ELISA高 1 0 4~1 0 5 倍 .基因探针的构建方法完全避免了蛋白质与有机溶剂的接触 ,基本保持了抗体的原有活性 ;并且人为地将蛋白质定向地锚定在dsDNA分子上 ,使PCR扩增不受任何影响 .构建的基因探针采用一定的保藏方法 ,室温中活性保存至少 6个月 .构建方法精简 ,成本低 ,易于推广应用
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关 键 词: | 叶绿素 基因探针 免疫PCR 抗体 抗原 |
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