| 抗精子单克隆抗体6B10的免疫定位及其相应抗原分析 |
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| 引用本文： | 高绍荣,胡国俊,段崇文,刘辉,韩之明,宋祥芬,陈大元.抗精子单克隆抗体6B10的免疫定位及其相应抗原分析[J].中国科学C辑,1998,28(6):548. |
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| 作者姓名： | 高绍荣 胡国俊 段崇文 刘辉 韩之明 宋祥芬 陈大元 |
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| 作者单位： | 中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室 北京100080 |
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| 摘 要： | 利用杂交瘤技术制备小鼠抗精子单克隆抗体 6B1 0 ,为IgG型免疫球蛋白 .通过 (NH4) 2 SO4盐析并结合蛋白A SepharoseCL 4B亲和层析法纯化单克隆抗体6B1 0 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析抗体纯度 .采用金霉素荧光染色法 (CTC)检测精子顶体反应 ,发现单克隆抗体 6B1 0可以显著地抑制孕酮诱导的精子顶体反应 .采用间接免疫荧光法和胶体金免疫电镜观察发现单克隆抗体 6B1 0的相应抗原定位于精子顶体质膜上 .用 1 %TritonX -1 0 0抽提精子全蛋白 ,采用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳结合免疫印迹实验 (Westernblot)发现单克隆抗体 6B1 0所识别的抗原为 5 0ku的蛋白 ,此蛋白为精子顶体反应发生过程中的关键蛋白之一 ,可能成为免疫灭鼠与免疫避孕的候选疫苗
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| 关 键 词： | 单克隆抗体 杂交瘤技术 孕酮 抗原 顶体反应 |
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