| 枯草杆菌蛋白酶E基因多位点定点突变库的构建及其筛选 |
| |
| 引用本文： | 谢毅,肖谷田,张婕,孙筱清,吴小舟,王启松,陈小央.枯草杆菌蛋白酶E基因多位点定点突变库的构建及其筛选[J].中国科学C辑,1997,27(2):97. |
| |
| 作者姓名： | 谢毅 肖谷田 张婕 孙筱清 吴小舟 王启松 陈小央 |
| |
| 作者单位： | 复旦大学遗传研究所遗传工程国家重点实验室 上海200433 |
| |
| 摘 要： | 利用化学合成的15个寡聚核苷酸片段作为诱变引物,同时对枯草杆菌蛋白酶E(Subtilisin E或Apr E)基因进行体外突变,获得了合全部突变位点各种随机组合突变的突变库,通过点杂交法和DNA序列分析肯定了该突变库的可靠性.从突变库中选择一单点突变(Met222Ala)和3点突变(Asn76Asp/Asn109Ser/Ile205Cys)的基因进行克隆、表达和产物的酶学性质研究,发现其抗氧化性和热稳定性分别比野生型的有显著提高,与文献报道的一致.表明了该突变库在枯草杆菌蛋白酶工程研究中的应用价值.
|
| 关 键 词： | 定点突变 多位点定点突变 蛋白质工程 Subtilisin E |
|
| 点击此处可从《中国科学C辑》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国科学C辑》下载免费的PDF全文 |
|
