| 以HSV-1扩增子载体构建的新型重组AAV载体包装系统 |
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| 引用本文： | 舒跃龙,吴小兵,杨天忠,贡惠宇,侯云德,颜子颖.以HSV-1扩增子载体构建的新型重组AAV载体包装系统[J].中国科学C辑,1998,28(5):457. |
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| 作者姓名： | 舒跃龙 吴小兵 杨天忠 贡惠宇 侯云德 颜子颖 |
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| 作者单位： | 病毒基因工程国家重点实验室 北京100052 |
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| 摘 要： | 将缺失两端ITR的AAV -2基因组克隆于HSV -1扩增子载体获得了质粒pHSV AAV .以HSV- 1tsK株为辅助病毒感染转染了该质粒的Vero细胞 ,可获得一种具有包装重组AAV质粒能力的混合毒种 .连续传代可使其包装能力迅速升高 ,至 5～ 6代达到最高并趋于平稳 .此混合毒种中 ,含有包装了多拷贝AAV -2基因组的复制缺陷性假型HSV- 1病毒 ,它可表达AAV -2编码的复制与包装所需的各种反式蛋白 ;同时也含有HSV -1tsK病毒 ,它提供AAV -2复制与包装所需的全部辅助病毒功能 .实验结果也表明 ,HSV -1tsK病毒的复制为混合毒种辅助重组AAV载体的包装所必需 .这项研究首次报道了一种全新的重组AAV载体包装系统 ,与传统的双质粒共转染、腺病毒辅助包装方案相比 ,本系统简便易行 ,并明显提高了重组AAV的包装效率 .
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| 关 键 词： | 重组AAV载体 HSV-1扩增子载体 混合毒种 包装系统 |
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