| 逆转病毒介导的突变型p53基因增加人肺癌细胞耐药性研究 |
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| 引用本文： | 高振强,高志萍,刘喜富,张志华,张涛,孙仁会.逆转病毒介导的突变型p53基因增加人肺癌细胞耐药性研究[J].中国科学C辑,1997,27(2):168. |
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| 作者姓名： | 高振强 高志萍 刘喜富 张志华 张涛 孙仁会 |
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| 作者单位： | 北京医科大学病理学系 北京100083 |
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| 摘 要： | 应用PCR等方法从含有p53基因突变的人肺癌细胞系GL总RNA中扩增并克隆了人突变型p53基因(mt)cDNA.序列分析证实该cDNA含有人p53基因全部编码序列,在codon245出现了G→T突变,导致由甘氨酸变为半胱氨酸.构建了其逆转病毒表达载体(pD53M),并将该载体导入没有p53突变的药物敏感癌细胞系GAO.免疫组织化学证实pD53M转染的GAO细胞有突变型p53蛋白表达,说明重组逆转病毒表达载体pD53M在GAO细胞中可以稳定表达.体内和体外实验表明pD53M转染的GAO细胞对几种抗癌药的耐药性有不同程度的增加,最高增加了4倍.用定量PCR和FCM分析发现转染细胞MDR1基因表达没有增高,Pgp功能没有加强,MRP基因表达轻度增高,Mrp功能稍微加强,这提示突变型p53导致的耐药性可能与MDR1/Pgp无关,而与MRP/Mrp可能有一定关系.
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| 关 键 词： | 人肺癌 p53基因 基因克隆 基因转染 耐药性 |
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