人凝血因子ⅨcDNA在C2C12成肌细胞及C3H小鼠中的高效表达 |
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引用本文: | 王宏伟,李朝霞,包赟,卢大儒,邱信芳,薛京伦.人凝血因子ⅨcDNA在C2C12成肌细胞及C3H小鼠中的高效表达[J].中国科学C辑,1997,27(2):186. |
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作者姓名: | 王宏伟 李朝霞 包赟 卢大儒 邱信芳 薛京伦 |
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作者单位: | 复旦大学遗传学研究所 上海200433 |
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摘 要: | 以小鼠C2C12成肌细胞为对象开展血友病B基因治疗研究.除已有的XLIX,LNCIX和GlNaCIX反转录病毒载体外,又首次将微小MCK(muscle creatinekinase)增强子顺序构建到hCMV(human cytomegalovirus)启动子上游,共同控制FIXcDAN的转录.用带有上述4种载体的病毒悬液分别感染C2C12细胞后,ELISA检测结果发现,FIX蛋白离体表达水平为:G1NaMCIX>GlNaCIX>LNCIX>XLIX.其中C2C12/G1NaMCIX混合克隆高达640ng/(10~6细胞·24h).C2C12/G1NaMCIX细胞注射C3H小鼠后肢骨骼肌肉组织,人FIX蛋白持续表达35d,其中最高表达峰达206ng/mL血浆.此结果对于研究FIX cDNA在脱细胞中的表达调控以及采用成肌细胞移植途径开展血友病B基因治疗研究有重要意义.
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关 键 词: | 成肌细胞 人凝血因子Ⅸ 基因转移 基因治疗 |
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