高密度培养大肠杆菌YK537/pSBHL11生产重组人细胞白介素-3

在B.Braun ES-10型15L和NBS BioFlo 3000型5L发酵罐中，利用补料分批培养技术高密度表达培养含重组质粒pSBHL-11的大肠杆菌YK537，生产重组人白细胞介素-3(IL-3)，发现在发酵过程中，限制性流加甘油，控制溶解氧在30%～40％左右、30℃生长11h，42℃诱导培养4h，能将发酵液中最终菌体密度从OD₁₆600提高到OD₅₃600(相当于每升发酵液含106克湿菌体)，并且保持了白细胞介素-3的表达量，占菌体总蛋白的30%左右，含量超过3.3%g/L，使IL-3包涵体产量从湿重2.2g/L提高到8.5 g/L，纯化步骤比较简单，超声破菌后经两次洗涤纯度就达到70%以上。