| 产酸克雷伯氏菌赖氨酸脱羧酶的异源表达及粗酶性质 |
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| 引用本文： | 李乃强,于丽珺,徐岩.产酸克雷伯氏菌赖氨酸脱羧酶的异源表达及粗酶性质[J].生物工程学报,2016,32(4):527-531. |
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| 作者姓名： | 李乃强 于丽珺 徐岩 |
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| 作者单位： | 1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122；2 上海凯赛生物技术研发中心有限公司，上海 201203,2 上海凯赛生物技术研发中心有限公司，上海 201203,1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2011AA02A204-04) 资助。 |
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| 摘 要： | 赖氨酸脱羧酶,可以催化赖氨酸脱羧生成戊二胺。戊二胺是重要的平台化合物,可以合成新型聚酰胺材料、脂肪族异氰酸酯等新材料。本研究对来自于产酸克雷伯氏菌的赖氨酸脱羧酶进行异源表达。以pUC18质粒为载体,将来源于产酸克雷伯氏菌的赖氨酸脱羧酶基因ldc克隆到大肠杆菌,得到菌株LN18。在添加0.5 mmol/L IPTG的LB培养基中,对LN18进行摇瓶培养,发酵液酶活可达到35 U/g发酵液,从发酵液制备的赖氨酸脱羧酶粗酶蛋白的酶活可以达到30 000 U/g粗蛋白。产酸克雷伯氏菌赖氨酸脱羧粗酶蛋白大小约80 kDa,粗酶的最适温度和pH值分别为55℃和5.5,与文献中报道的大肠杆菌的赖氨酸脱羧酶Cad A在pH 8.0几乎没有酶活不同,产酸克雷伯氏菌的赖氨酸脱羧酶在pH 8.0的酶活达到最优pH下酶活的30%以上。金属离子对酶活有一定的影响,Mg~(2+)对酶活有促进作用,Fe~(2+)、Zn~(2+)、Ca~(2+)有一定的抑制作用。
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| 关 键 词： | 赖氨酸脱羧酶 产酸克雷伯氏菌 戊二胺 异源表达 pH稳定性 |
| 收稿时间： | 2015/8/28 0:00:00 |
Heterologous expression and characterization of Klebsiella oxytoca lysine decarboxylase |
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| Naiqiang Li,Lijun Yu and Yan Xu.Heterologous expression and characterization of Klebsiella oxytoca lysine decarboxylase[J].Chinese Journal of Biotechnology,2016,32(4):527-531. |
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| Authors: | Naiqiang Li Lijun Yu and Yan Xu |
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| Institution: | 1 Key Laboratory of Industrial Biotechnology of Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China; 2 Cathay Industrial Biotech Ltd., Shanghai 201203, China,2 Cathay Industrial Biotech Ltd., Shanghai 201203, China and 1 Key Laboratory of Industrial Biotechnology of Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | lysine decarboxylase Klebsiella oxytoca cadaverine heterologous expression pH stability |
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