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启动子Ptac与PsbA在鱼腥藻7120中表达hG-CSF的效率比较
引用本文:宁文艳,吴先敏,王春梅,陈伟东,施定基.启动子Ptac与PsbA在鱼腥藻7120中表达hG-CSF的效率比较[J].微生物学杂志,2014(3):36-41.
作者姓名:宁文艳  吴先敏  王春梅  陈伟东  施定基
作者单位:北京中医药大学 中药学院 生物制药系,北京 100102,北京中医药大学 中药学院 生物制药系,北京 100102,北京中医药大学 中药学院 生物制药系,北京 100102,北京中医药大学 中药学院 生物制药系,北京 100102,中国科学院植物研究所,北京 100093
基金项目:北京中医药大学自主选题项目(2013-JYBZZ-JS-139)
摘    要:为了比较外源性启动子Ptac与内源性启动子PsbA在鱼腥藻7120中表达外源基因时的效率,构建了分别含Ptac和PsbA两种启动子的穿梭表达载体pRL-PsbA-GCSF、pRL-Tac-GCSF;利用三亲结合转移法转化鱼腥藻7120,利用抗生素筛选,通过质粒提取和PCR方法鉴定,获得了分别由2种启动子驱动表达hG-CSF的转基因蓝藻,转基因藻中目的基因以质粒形式存在;利用半定量RT-PCR方法对2种转基因藻的hG-CSF转录水平进行比较,发现PsbA启动子驱动效率与Ptac启动子没有明显差异;利用ELISA方法比较hG-CSF蛋白表达量,发现PsbA启动的蓝藻中hG-CSF表达量是Ptac诱导条件下表达量的1.17倍。

关 键 词:鱼腥藻PCC7120  人粒细胞集落刺激因子  Ptac  PsbA  表达
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