| 离体大鼠心肌内质网应激模型构建条件的优化 |
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| 引用本文： | 张改改,滕旭,刘越,吴扬,宁明,齐永芬,尹新华.离体大鼠心肌内质网应激模型构建条件的优化[J].中国实验动物学报,2013(6):1-7. |
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| 作者姓名： | 张改改 滕旭 刘越 吴扬 宁明 齐永芬 尹新华 |
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| 作者单位： | [1]清华大学第一附属医院北京华信医院老年医学科,北京100016 [2]北京大学医学部教育部分子心血管病学重点实验室,北京100191 [3]哈尔滨医科大学第一附属医院心内科,哈尔滨150086 |
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| 摘 要： | 目的探讨构建体外心肌内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）模型的方法及实验条件。方法应用Langendorff灌流装置制作大鼠心脏离体缺血/再灌注模型,采用PowerLab系统持续监测血流动力学参数,Western blot检测缺血（停止灌流）不同时间/再灌注120 min后心肌ERS标志性分子糖调节蛋白（GRP）78的表达,并检测C/EBP同源蛋白（CHOP）的表达;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测二者mRNA的表达;体外孵育心肌组织切片,分别应用不同浓度的衣霉素（tunicamycin,Tm）和二硫苏糖醇（dithiothreitol,DTT）处理3 h和6 h,Western-blot检测心肌GRP78及CHOP的表达。结果与对照组相比,离体灌注心脏缺血40 min/再灌注120 min时,心肌GRP78表达最高（P〈0.01）,CHOP蛋白、GRP78 mRNA及CHOP mRNA表达均明显升高（P〈0.01,P〈0.05和P〈0.05）,同时,各项血流动力学参数受损（均P〈0.01）;Tm 10μg/mL和DTT 2 mmol/L孵育心肌组织切片3 h时,GRP78表达较对照组显著升高（均P〈0.001）,CHOP表达亦均明显升高（P〈0.05和P〈0.01）。结论使用离体大鼠心脏缺血/再灌注和孵育心肌组织切片的方法,均可成功构建体外心肌ERS模型。
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| 关 键 词： | 心脏 内质网应激 缺血 再灌注损伤 组织切片孵育 糖调节蛋白78 |
Optimization of the conditions in construction of a rat myocardial model of endoplasmic reticulum stress in vitro |
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| ZHANG Gai-gai;TENG Xu;LIU Yue;WU Yang;NING Ming;QI Yong-fen;YIN Xin-hua.Optimization of the conditions in construction of a rat myocardial model of endoplasmic reticulum stress in vitro[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2013(6):1-7. |
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| Authors: | ZHANG Gai-gai;TENG Xu;LIU Yue;WU Yang;NING Ming;QI Yong-fen;YIN Xin-hua |
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| Institution: | ZHANG Gai-gai;TENG Xu;LIU Yue;WU Yang;NING Ming;QI Yong-fen;YIN Xin-hua;Department of Geriatrics and Gerontology,Beijing Huaxin Hospital,the First Affiliated Hospital of Tsinghua University;Key Laboratory of Molecular Cardioangiology,Ministry of Education, Peking University Health Science Center;Department of Cardiology,the First Affiliated Hospital of Harbin Medical University; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Heart Endoplasmic reticulum stress Ischemia/reperfusion injury Tissue slice incubation Glucoseregulated protein 78 |
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