| 伤寒沙门菌Ⅵ型分泌系统对SopE表达影响的初步研究 |
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| 引用本文： | 石书娟,刘秀雯,翁轶玮,党娟娟,李泽宇,张盈,黄新祥.伤寒沙门菌Ⅵ型分泌系统对SopE表达影响的初步研究[J].微生物与感染,2023(1):21-28. |
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| 作者姓名： | 石书娟 刘秀雯 翁轶玮 党娟娟 李泽宇 张盈 黄新祥 |
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| 作者单位： | 江苏大学医学院 |
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| 基金项目： | 江苏省高等学校自然科学研究重大项目(20KJA310006)；;江苏省博士后科研资助计划(2021K209B)； |
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| 摘 要： | 为探索伤寒沙门菌Ⅵ型分泌系统(type 6 secretion system, T6SS)对SopE表达的影响，阐明其中的分子机制，本研究利用自杀质粒同源重组法构建携带sopE∷3×Flag的伤寒沙门菌野生株(WT-pBAD33)、T6SS功能分子缺陷株(ΔsciG-pBAD33)和回补株(C-ΔsciG),用构建成功的菌株感染巨噬细胞THP-1并在模拟巨噬细胞内环境(LPM培养基、微需氧)下培养，通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)与蛋白质印迹法(Western blot, WB)试验探索T6SS对SopE表达的影响，采用β-半乳糖苷酶活性检测来进一步验证sopE基因启动子的转录水平，Ni柱纯化T6SS功能蛋白SciG,电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)研究SciG蛋白对sopE基因启动子的调控作用。结果显示：ΔsciG-pBAD33中SopE表达水平较于WT-pBAD33明显降...
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| 关 键 词： | 伤寒沙门菌 Ⅵ型分泌系统 SopE 巨噬细胞 |
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