| 固氮施氏假单胞菌亚硝酸盐还原酶基因nirS转录特性及功能鉴定 |
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| 引用本文： | 弓湃,王丽英,尚立国,战嵛华,平淑珍,燕永亮,林敏. 固氮施氏假单胞菌亚硝酸盐还原酶基因nirS转录特性及功能鉴定[J]. 微生物学通报, 2015, 42(1): 93-100 |
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| 作者姓名： | 弓湃 王丽英 尚立国 战嵛华 平淑珍 燕永亮 林敏 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院生物技术研究所 北京 100081,中国农业科学院生物技术研究所 北京 100081,中国农业科学院生物技术研究所 北京 100081,中国农业科学院生物技术研究所 北京 100081,中国农业科学院生物技术研究所 北京 100081,中国农业科学院生物技术研究所 北京 100081,中国农业科学院生物技术研究所 北京 100081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No. 31230004，31170081，31070084)；中央科研院所基本科研业务费-农业微生物研究项目；广东省引进创新创业团队计划项目(No. 2013S033) |
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| 摘 要： | 【目的】研究固氮施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501亚硝酸盐还原酶结构基因nir S的转录调控机制及其在反硝化过程中的功能。【方法】构建nir S-lac Z融合载体,利用三亲本结合法将其导入野生型A1501,通过β-半乳糖苷酶活性的测定,分析不同供氧状况、不同浓度的硝酸盐、亚硝酸盐对nir S基因表达的影响;同时将该载体导入rpo N突变株中,研究氮代谢调控因子Rpo N对nir S基因转录影响。通过同源重组方法构建nir S突变株,通过生化表型测定明确nir S在反硝化过程中的功能。【结果】启动子活性测定表明,nir S基因厌氧条件下高水平表达,是好氧条件下表达水平的4倍;nir S的表达受硝酸盐诱导,但不受亚硝酸盐的诱导;Rpo N突变株中,nir S的表达活性为野生型的1/4,nir S启动子未发现Rpo N的保守结合位点,表明nir S的表达受Rpo N间接调控。表型测定显示以硝酸盐为电子受体时Δnir S的反硝化能力降低了约20%;以亚硝酸盐为电子受体时Δnir S仅有微弱的反硝化能力,并且nir S的突变使得菌体在反硝化条件下利用亚硝酸盐的能力显著减弱。nir S突变提高了菌体在亚硝酸为电子受体的反硝化条件下的固氮酶活。【结论】A1501中nir S基因的转录受外界氧及硝酸盐的影响,同时受氮代谢Sigma因子Rpo N的调控。nir S在A1501菌反硝化过程中起关键作用,参与了亚硝酸盐的转化。
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| 关 键 词： | 固氮施氏假单胞菌A1501 反硝化 nirS |
The transcriptional regulation and functional identification of nitrite reductase nirS in Pseudomonas stutzeri A1501 |
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| GONG Pai,WANG Li-Ying,SHANG Li-Guo,ZHAN Yu-Hu,PING Shu-Zhen,YAN Yong-Liang and LIN Min. The transcriptional regulation and functional identification of nitrite reductase nirS in Pseudomonas stutzeri A1501[J]. Microbiology China, 2015, 42(1): 93-100 |
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| Authors: | GONG Pai WANG Li-Ying SHANG Li-Guo ZHAN Yu-Hu PING Shu-Zhen YAN Yong-Liang LIN Min |
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| Affiliation: | Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China and Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pseudomonas stutzeri A1501 Denitrification nirS |
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