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假单胞菌GP72 rpeB突变株的构建及其对吩嗪类抗生素合成的调控
引用本文:赵嘉,陈明敏,胡洪波,张雪洪. 假单胞菌GP72 rpeB突变株的构建及其对吩嗪类抗生素合成的调控[J]. 微生物学通报, 2015, 42(1): 3-8
作者姓名:赵嘉  陈明敏  胡洪波  张雪洪
作者单位:上海交通大学生命科学技术学院 微生物代谢国家重点实验室 上海 200240,上海交通大学生命科学技术学院 微生物代谢国家重点实验室 上海 200240,上海交通大学生命科学技术学院 微生物代谢国家重点实验室 上海 200240,上海交通大学生命科学技术学院 微生物代谢国家重点实验室 上海 200240
基金项目:国家自然科学基金项目(No. 31270084);国家863计划项目(No. 2012AA022107)
摘    要:[目的]绿针假单胞菌GP72是一株可生产吩嗪类抗生素吩嗪-1-羧酸(PCA)及2-羟基吩嗪(2-OH-PHZ)的生防假单胞菌.RpeA/RpeB双元调控系统是其双元调控系统中的一组,本文旨在研究这一系统中的应答调控子(RR)RpeB对于PCA及2-OH-PHZ的生物合成影响.[方法]通过生物信息学分析获得了rpeA/rpeB双元调控系统的序列,并从GP72中扩增出rpeB基因,通过同源重组技术构建卡那霉素抗性片段插入突变rpeB的突变菌株GP72BN.利用发酵实验、rpeB基因回补实验及荧光定量PCR实验,验证rpeB对于吩嗪类抗生素合成及相关基因表达的调控作用.[结果]在KMB培养基中,rpeB突变株的PCA产量下降为野生型的49.5%,2-OH-PHZ产量下降为野生型的67.3%.rpeB基因的回补可以在一定程度上回复PCA及2-OH-PHZ的产量.荧光定量PCR实验结果表明,rpeB突变株中群体感应系统基因phzI/phzR及吩嗪合成基因簇基因phzE转录水平均显著下调,而PCA转化为2-OH-PHZ的修饰基因phzO转录水平变化不显著.[结论]RpeB正调控PCA与2-OH-PHZ合成途径的表达.RpeB很可能是通过调控群体感应基因phzI/phzR和phz基因簇的表达,从而影响PCA的合成,并间接调控其衍生物2-OH-PHZ的合成.

关 键 词:假单胞菌GP72  rpeB  吩嗪-1-羧酸  2-羟基-吩嗪

Construction of Pseudomonas sp. GP72 rpeB mutant and its regulation on PCA and 2-OH-PHZ biosynthesis
ZHAO Ji,CHEN Ming-Min,HU Hong-Bo and ZHANG Xue-Hong. Construction of Pseudomonas sp. GP72 rpeB mutant and its regulation on PCA and 2-OH-PHZ biosynthesis[J]. Microbiology China, 2015, 42(1): 3-8
Authors:ZHAO Ji  CHEN Ming-Min  HU Hong-Bo  ZHANG Xue-Hong
Affiliation:School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong University, State Key Laboratory of Microbial Metabolism, Shanghai 200240, China,School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong University, State Key Laboratory of Microbial Metabolism, Shanghai 200240, China,School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong University, State Key Laboratory of Microbial Metabolism, Shanghai 200240, China and School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong University, State Key Laboratory of Microbial Metabolism, Shanghai 200240, China
Abstract:
Keywords:P. chlororaphis GP72   rpeB   Phenazine-1-carboxilic acid   2-Hydroxyphenazine
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