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含不同个数基序乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白结合活性比较
引用本文:乔绪稳,李鹏成,郑其升,陈瑾,于晓明,侯立婷,吴楠,侯继波. 含不同个数基序乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白结合活性比较[J]. 微生物学报, 2015, 55(2): 193-197
作者姓名:乔绪稳  李鹏成  郑其升  陈瑾  于晓明  侯立婷  吴楠  侯继波
作者单位:江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程研究中心,江苏南京210014,江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程研究中心,江苏南京210014,江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程研究中心,江苏南京210014,江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程研究中心,江苏南京210014,江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程研究中心,江苏南京210014,江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程研究中心,江苏南京210014,江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程研究中心,江苏南京210014,江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程研究中心,江苏南京210014
基金项目:江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(12)5062];公益性行业(农业)科研专项(201303046)
摘    要:【目的】比较两种含不同个数基序乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor,PA)的结合活性。【方法】首先应用PCR技术分别扩增得到含有2个或3个自溶素基序(Lysin Motif,Lys M)基因片段的PA2与PA3;然后应用p ET-32a(+)质粒构建原核表达载体,将其转化大肠杆菌BL-21(DE3),进行诱导表达,获得目的蛋白;最后将经复性后的PA2、PA3融合蛋白与GEM(Gram-positive Enhancer Matrix,GEM)颗粒结合,经Western blot、透射电镜与SDS-PAGE进行结合鉴定与结合活性比较分析。【结果】融合蛋白PA2、PA3复性后都能与GEM结合,PA3与GEM颗粒的结合活性明显好于PA2。【结论】含有3个Lys Ms的PA对GEM的结合活性明显优于含有2个Lys Ms的PA。本研究可为进一步完善乳球菌外壳-蛋白锚钩展示系统提供理论基础。

关 键 词:乳酸乳球菌  肽聚糖锚钩蛋白  原核表达  GEM  结合活性
收稿时间:2014-06-26
修稿时间:2014-09-25

Comparison of the binding activity of Lactococcus lactis peptidoglycan protein anchor with different number of motifs
Xuwen Qiao,Pengcheng Li,Qisheng Zheng,Jin Chen,Xiaoming Yu,Liting Hou,Nan Wu and Jibo Hou. Comparison of the binding activity of Lactococcus lactis peptidoglycan protein anchor with different number of motifs[J]. Acta microbiologica Sinica, 2015, 55(2): 193-197
Authors:Xuwen Qiao  Pengcheng Li  Qisheng Zheng  Jin Chen  Xiaoming Yu  Liting Hou  Nan Wu  Jibo Hou
Affiliation:Xuwen Qiao;Pengcheng Li;Qisheng Zheng;Jin Chen;Xiaoming Yu;Liting Hou;Nan Wu;Jibo Hou;National Research Center of Engineering and Technology for Veterinary Biologicals,Jiangsu Academy of Agricultural Science;College of Veterinary,Yangzhou University;
Abstract:
Keywords:Lactococcus lactis  peptidoglycan protein anchor  prokaryotic expression  GEM  binding activity
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