| 构建链霉菌无细胞平台挖掘套索肽类天然产物 |
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| 引用本文： | 潘陈梦笑,刘天罡,刘然.构建链霉菌无细胞平台挖掘套索肽类天然产物[J].微生物学报,2022,62(5):1754-1768. |
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| 作者姓名： | 潘陈梦笑 刘天罡 刘然 |
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| 作者单位： | 武汉大学药学院, 组合生物合成与新药发现教育部重点实验室, 武汉 湖北 430071;中国科学院深圳先进技术研究院合成生物学研究所, 中国科学院定量工程生物学重点实验室, 深圳 广东 518055 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2018YFA0900400,2021YFC2101000);国家自然科学基金(31971341,32100053);深圳合成生物学研究所科研项目(HSY89901038) |
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| 摘 要： | 【目的】套索肽作为一类核糖体翻译后修饰肽(RiPPs)广泛分布于放线菌中，以其独特的修饰结构和多样的生理活性受到了广泛的关注。为了更好地研究未知的套索肽，期望开发基于链霉菌的无细胞转录翻译平台(下称“无细胞平台”)实现无细胞合成套索肽或其前体肽。【方法】首先尝试以不同的链霉菌构建无细胞合成平台，并以绿色荧光蛋白为报告蛋白对平台产率进行优化；在构建合适稳定的表达体系后，将包含有套索肽生物合成基因的质粒引入体系中以探索套索肽的无细胞合成。【结果】在对基于模式菌株Streptomyces lividans TK24的无细胞体系进行制备工艺、体系组分、反应条件等多个参数进行优化后，该体系最高能达到90μg/mL的荧光蛋白表达量；基于该体系成功表达了目标套索肽的前体肽，并通过融合SUMO标签增加前体肽在该体系中的稳定性。【结论】本研究成功构建了一类链霉菌无细胞平台，为丰富来源的基因表达提供了可能性。尽管该体系在对表达套索肽未知蛋白的适用性上仍有待进一步提升，但无细胞平台在天然产物的探索中将起到越来越重要的作用。
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| 关 键 词： | 链霉菌 无细胞平台 套索肽 天然产物 |
| 收稿时间： | 2021/9/6 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2021/11/14 0:00:00 |
Developing a Streptomyces-based cell-free platform for discovery of lasso peptides |
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| PAN Chenmengxiao,LIU Tiangang,LIU Ran.Developing a Streptomyces-based cell-free platform for discovery of lasso peptides[J].Acta Microbiologica Sinica,2022,62(5):1754-1768. |
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| Authors: | PAN Chenmengxiao LIU Tiangang LIU Ran |
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| Institution: | Key Laboratory of Combinatorial Biosynthesis and Drug Discovery, Ministry of Education, School of Pharmaceutical Sciences, Wuhan University, Wuhan 430071, Hubei, China; CAS Key Laboratory of Quantitative Engineering Biology, Shenzhen Institute of Synthetic Biology, Shenzhen Institute of Advanced Technology, Chinese Academy of Sciences, Shenzhen 518055, Guangdong, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Streptomyces cell-free platform lasso peptide natural products |
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