| 甜菜单体附加系M14花蕾cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 郑天然,李荣田,孙晓凌,李海英,郭德栋.甜菜单体附加系M14花蕾cDNA文库的构建[J].生物技术,2004,14(6):10-12. |
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| 作者姓名： | 郑天然 李荣田 孙晓凌 李海英 郭德栋 |
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| 作者单位： | 黑龙江大学生命科学学院,黑龙江,哈尔滨,150080 |
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| 基金项目： | 国家转基因植物研究与产业化开发专项 (JY0 3 -A - 2 4 0 2 )，黑龙江省自然科学基金重点项目 (ZJN - 0 3 - 6) |
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| 摘 要： | 为了克隆甜菜单体附加系M14无融合生殖相关基因 ,采用cDNA文库快速构建法制备了M14花蕾cDNA文库。根据甜菜单体附加系M14无融合生殖的细胞胚胎学研究结果 ,提取甜菜M14花蕾三个关键时期的RNA ,分离纯化mRNA ,以Oligo(dT)为引物 ,在逆转录酶的作用下 ,合成第一链cDNA ,进而合成第二链cDNA。含有EcoRⅠ和NotⅠ粘性末端的双链cDNA在T4DNA连接酶的作用下与载体λZAP臂相连 ,并对连接产物进行体外包装 ,得到噬菌体颗粒 ,即甜菜单体附加系M14花蕾cDNA文库。经大肠杆菌寄主菌株XL1-blueMRF’平板检测 ,三个文库滴度分别为 2 .8× 10 5pfu·mL-1、1.6× 10 5pfu·mL-1和 3.5× 10 5pfu·mL-1,克隆重组率为 83%、78%和 81%。cDNA文库可直接用于目的基因的筛选
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| 关 键 词： | 甜菜 无融合生殖 单体附加系 cDNA文库 |
| 文章编号： | 1004-311X(2004)06-0010-03 |
| 修稿时间： | 2004年2月27日 |
Construction of cDNA Library of M14 Bud, Themonosomic Addition Lines of Beta vulgaris |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Beta vulgaris Apomixis monosomic addition lines cDNA library |
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