Netrin-1慢病毒表达载体的构建及延缓TGF—β诱导HK-2细胞上皮-间充质转化的初步研究

目的：构建netrin-1基因的慢病毒表达载体，初步研究netrin-1在肾小管纤维化的作用。方法：将扩增的netrin-1表达片段克隆入FUW慢病毒表达载体，鉴定重组质粒正确性。利用HEK-293T细胞包装慢病毒，病毒感染人肾小管上皮HK-2细胞，Westernblot检测重组病毒netrin-1在真核细胞内表达表达；TGF-β刺激过表达netrin-1的HK-2细胞，利用Westemblot检测其纤维化指标的变化。结果：FUW—netrin-1慢病毒表达载体测序正确，并在感染病毒的细胞中检测出特异性条带，TGF-β刺激感染netrin-1慢病毒HK-2细胞的E-cadherin的下降水平比未感染病毒组低。结论：成功构建了netrin-1的慢病毒表达载体，发现netrin-1可能延缓肾小管内皮细胞发生纤维化。