| 重组胸腺素α1 pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌的构建与表达 |
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| 引用本文： | 刘中禄,陶翠兰,莘旭妮,李树民.重组胸腺素α1 pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌的构建与表达[J].中国实验动物学杂志,2012(7):13-16. |
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| 作者姓名： | 刘中禄 陶翠兰 莘旭妮 李树民 |
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| 作者单位： | [1]第三军医大学大坪医院野战外科研究所实验动物中心,重庆400042 [2]解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春130062 |
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| 基金项目： | 重庆市科技攻关计划项目（30111-14281）. |
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| 摘 要： | 目的构建表达重组胸腺素α1（Tα1）的pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌。方法将人工合成的Tα1序列进行PCR扩增,将扩增的片段和pMAL-C2x质粒载体分别经BamHI和EcoR I双酶切后,用T4 DNA快速连接酶连接构建pMAL-C2x-Tα1融合表达质粒,再经测序正确后,将重组体转化至大肠埃希菌TB1菌中,pMAL-C2x-Tα1/TB1菌在LB液体培养基中培养,经IPTG诱导表达麦芽糖结合蛋白与Tα1的融合蛋白（MBP-Tα1）,采用Westernblot对MBP-Tα1进行鉴定。结果 pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌能有效表达MBP-Tα1,融合蛋白占菌体蛋白的33.6%,分子量约为45×103。结论工程菌的成功构建和表达为重组Tα1的纯化、生物学活性等研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 重组胸腺素α1 基因克隆 质粒pMAL-C2x 融合表达 |
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