| 新型YdjM超家族成员的钠/氢逆向转运蛋白功能鉴定 |
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| 引用本文： | 王艳红,刘艳双,石德喜,朱保国,吕保磊,付诗雨,徐苗,王伟,殷奎德.新型YdjM超家族成员的钠/氢逆向转运蛋白功能鉴定[J].中国生物工程杂志,2018,38(12):32-40. |
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| 作者姓名： | 王艳红 刘艳双 石德喜 朱保国 吕保磊 付诗雨 徐苗 王伟 殷奎德 |
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| 作者单位： | 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院 大庆 163319 |
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| 基金项目： | * 国家自然科学基金(31771692)资助项目 |
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| 摘 要： | 在原核生物中,钠/氢逆向转运蛋白具有催化细胞内的Na~+、Li~+或K~+等碱基阳离子的排出,换取外部质子,以降低有毒碱性金属阳离子的细胞质浓度和维持细胞内pH稳态起到了至关重要的作用。为了进一步挖掘中度嗜盐菌Halobacillus Y5中具有盐碱耐受性的钠/氢逆向转运蛋白基因并对其功能进行鉴定,我们首先提取该菌的基因组DNA,然后采用Sau3AI随机酶切及功能互补的方法获得了一个新型的钠/氢逆向转运蛋白基因Ha_ydjM。生物信息学分析表明,该基因属于YdjM超家族成员,是一个未知功能的膜蛋白,系统发育分析证实,其与来自Halobacillus sp. Marseille-P 3789的YdjM(蛋白登录号WP_101846656. 1)家族成员聚在一起但形成独立分支。研究发现,该基因能够恢复大肠杆菌突变株KNabc对0. 2mol/L NaCl和5mmol/L Li Cl的耐受特性,并且耐受碱性pH 8. 0。功能分析显示,该蛋白呈现pH依赖的钠/氢逆向转运蛋白活性,转运动力学分析表明,Na~+、K~+、Li~+在KNabc中K_m值分别是0. 43±0. 05mmol/L、0. 49±0. 06mmol/L、0. 64±0. 06mmol/L,即对Na~+、K~+、Li~+的亲和力分别是Na~+ K~+ Li~+。综上所述,Ha_ydjM代表了一种新型的钠/氢逆向转运蛋白,这丰富了YdjM超家族成员,并为其他未知膜蛋白功能分析提供依据。
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| 关 键 词： | 钠/氢逆向转运蛋白 膜蛋白 功能鉴定 YdjM超家族 喜盐芽胞杆菌 |
| 收稿时间： | 2018-07-20 |
Functional Identification of Na +/H + Antiporter in Novel YdjM Superfamily Members |
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| WANG Yan-hong,LIU Yan-shuang,SHI De-xi,ZHU Bao-guo,LV Bao-lei,FU Shi-yu,XU Miao,WANG We,YIN Kui-de.Functional Identification of Na +/H + Antiporter in Novel YdjM Superfamily Members[J].China Biotechnology,2018,38(12):32-40. |
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| Authors: | WANG Yan-hong LIU Yan-shuang SHI De-xi ZHU Bao-guo LV Bao-lei FU Shi-yu XU Miao WANG We YIN Kui-de |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Na +/H + antiporter Membrane proteins Functional identification YdjM superfamily Halobacillus |
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