| 里氏木霉几丁质酶表达及其水解产物组成与结构分析 |
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| 引用本文： | 焦思明,程功,张毓宸,冯翠,任立世,李建军,杜昱光.里氏木霉几丁质酶表达及其水解产物组成与结构分析[J].中国生物工程杂志,2018,38(10):30-37. |
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| 作者姓名： | 焦思明 程功 张毓宸 冯翠 任立世 李建军 杜昱光 |
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| 作者单位： | 中国科学院过程工程研究所 生化工程国家重点实验室 北京 100190 |
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| 基金项目： | * 国家重点研发计划(2017YFD0200902);国家自然科学基金联合基金(U1608255);中科院重点部署(KFZD-SW-218) |
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| 摘 要： | 优化并全合成里氏木霉几丁质酶基因,在毕赤酵母中实现分泌表达。产物几丁质酶的蛋白浓度达0. 17mg/ml,最适pH为5. 6,最适温度为65℃,酶活为0. 52U/ml。该酶在50℃及以下较稳定。利用该酶水解低脱乙酰度壳聚糖并对产物的组成及结构进行分析。超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC-QTOF MS)检测及分析结果显示,酶解产物中包含至少41种聚合度2～18,不同脱乙酰度的壳寡糖组分;核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)检测及分析结果显示,产物壳寡糖的还原端主要为N-乙酰氨基葡萄糖,非还原端则同时含有N-乙酰氨基葡萄糖及氨基葡萄糖。相关结果可为壳寡糖的结构与功能关系研究提供参考。
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| 关 键 词： | 里氏木霉 几丁质酶 毕赤酵母 壳寡糖 UPLC-QTOF MS NMR |
| 收稿时间： | 2018-06-23 |
Expression of Chitinase from Trichoderma reesei and Analysis the Composition and Structure of its Hydrolysates |
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| Si-ming JIAO,Gong CHENG,Yu-chen ZHANG,Cui FENG,Li-shi REN,Jian-jun LI,Yu-guang DU.Expression of Chitinase from Trichoderma reesei and Analysis the Composition and Structure of its Hydrolysates[J].China Biotechnology,2018,38(10):30-37. |
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| Authors: | Si-ming JIAO Gong CHENG Yu-chen ZHANG Cui FENG Li-shi REN Jian-jun LI Yu-guang DU |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trichoderma reesei Chitinase Pichia pastoris Chitooligosaccharides UPLC-QTOF MS NMR |
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