| 人源CT55蛋白原核表达及单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 任建委,李军,李尚泽. 人源CT55蛋白原核表达及单克隆抗体的制备[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(11): 1-8. DOI: 10.13523/j.cb.20181101 |
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| 作者姓名： | 任建委 李军 李尚泽 |
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| 作者单位： | 西藏大学医学院 拉萨 850000 武汉爱博泰克生物科技有限公司 武汉 430072 武汉大学中南医院 武汉 430071 |
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| 基金项目： | * 武汉大学青年教师资助项目(2042018kf0076) |
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| 摘 要： | 为制备Cancer testis 55(CT55)单克隆抗体,需构建带有人源CT55片段的原核表达质粒,把该质粒转化Rosetta感受态进行原核表达并得到目的蛋白,蛋白质被纯化后免疫6周雌性BALB/c小鼠。按传统的单克隆抗体的制备方法,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(sp2/0)进行融合,经ELISA方法筛选及两次连续亚克隆,共获得多株能稳定分泌抗CT55蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,如3D8B7B12、4C8E1C9、3D8C10G9等。ELISA及Western blot(WB)分析结果表明,筛选的细胞株均能产生单克隆抗体,且该抗体均分别能与原核表达及真核表达的CT55蛋白发生特异性结合。单克隆抗体可用于免疫荧光试验,且与P53发生互作的荧光主要位于细胞核边缘。结果表明,成功制备了针对人源CT55蛋白的单克隆抗体。CT55蛋白单克隆抗体的制备为今后肝癌、胃癌、结肠癌等癌症的快速的病原学诊断以及CT55蛋白的结构和功能研究奠定了物质基础。
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| 关 键 词： | CT55 原核表达 单克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2018-06-23 |
Human CT55 Protein Prokaryotic Expression and Its Production of Monoclonal Antibody |
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| Jian-wei REN,Jun LI,Shang-ze LI. Human CT55 Protein Prokaryotic Expression and Its Production of Monoclonal Antibody[J]. China Biotechnology, 2018, 38(11): 1-8. DOI: 10.13523/j.cb.20181101 |
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| Authors: | Jian-wei REN Jun LI Shang-ze LI |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CT55 Prokaryotic expression Monoclonal antibody |
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