酿酒酵母磷酸甘油酸激酶基因(PGK1) 的分子克隆和特性研究

以大肠杆菌和酵母菌穿梭质粒pCN60为载体，大肠杆菌C600或HB101为受体构建成酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)Hind I基因文库。从基因文库中提取重组DNA转化酵母受体XSB44-35D(a，pgk1，leu1，ade1，trp1，gal1)，选出转化体Pgk1+琼脂糖凝腔电泳指出所插入的DNA片段长度为3．1kb。PGKl DNA片段插入的方向性是此基因的5’-。侧翼区靠近pCN60的BamH I位点，而3’-侧翼区接近Bg1 I位点。Cla I，EcoRV，Kpn I，Xba I，Pst I，Hind Ⅱ，BamH I及Pvu I等核酸内切酶制作的酶切图谱的结果表明，除报道的PGK酶切位点外，还发现一个新的Kpn I及一个新的Cla I位点。