| 丹参不同愈伤组织诱导及遗传转化体系优化 |
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| 引用本文： | 张林甦,邵芬娟,秦利军.丹参不同愈伤组织诱导及遗传转化体系优化[J].广西植物,2017,37(1). |
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| 作者姓名： | 张林甦 邵芬娟 秦利军 |
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| 作者单位： | 1. 黔南民族医学高等专科学校 药学系,贵州 都匀,558003;2. 中国林业科学研究院 林业研究所林木遗传育种国家重点实验室,北京,100091;3. 贵州大学 农业生物工程研究院 山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室,贵阳,550025 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研基金(20111106110033)[Supported by the Research Fund for the Doctoral Program of Higher Education of China(20111106110033)]。 |
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| 摘 要： | 为了获得满足不同目的组织培养材料和稳定高效的遗传转化体系,该研究以丹参叶片和茎段为外植体,采用含不同浓度的植物激素(植物生长物质)的Murashige Skoog(MS)培养基,探索诱导丹参产生不同愈伤的条件;采用正交法考察浸染时间、共培养时间、筛选压等对农杆菌介导的丹参遗传转化体系的影响,并根据出芽率及转化阳性率优化丹参遗传转化体系。结果表明:(1)能较快诱导丹参叶片产生愈伤的是MS+0.5mg·L~(-1)6-BA+0.5 mg·L~(-1)2,4-D;诱导茎较快产生愈伤的是MS+0.1mg·L~(-1)NAA+0.5 mg·L~(-1)6-BA;1 mg·L~(-1)反式玉米素(ZR)可能有利于诱导产生含有丹参酮的愈伤组织;1.0 mg·L~(-1)2,4-D较易诱导丹参愈伤组织生根。(2)以卡那霉素为筛选剂时农杆菌GV3101介导的丹参遗传转化的条件为浸染5 min、共培养1 d、卡那霉素30 mg·L~(-1)筛选,经PCR鉴定转基因阳性率为60%;而用10 mg·L~(-1)链霉素筛选阳性率达70%。该研究结果确定了丹参不同愈伤组织诱导条件,明确了以卡那霉素为筛选剂时农杆菌GV3101介导的丹参遗传转化的条件,换用10 mg·L~(-1)链霉素筛选时体系更加稳定、更易操作、更易重复。
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| 关 键 词： | 丹参 愈伤 诱导 遗传转化 |
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